白菜小孢子发育相关基因BCMF2的分离和表达特征分析

【作者】 曹家树； 王永勤； 余小林； 叶纨芝； 向珣； 卢刚；

【机构】 浙江大学蔬菜研究所细胞与分子生物学实验室；

【摘要】 利用cDNA-AFLP技术,以A18和T16引物为引物对,对‘矮脚黄’白菜(Brassicacampestris L.ssp.chinensis Makino var.communis Tsen et Lee cv.Aijiaohuang)雄性不育两系不育株系与可育株系的表达差异进行分析,结果在可育中蕾和可育大蕾中特异表达的差异条带一条,且可育大蕾表达量强于可育中蕾;可育系莲座期叶,开花期叶、花茎、小蕾和不育系各部位未表达。将该基因命名为BCMF2,回收克隆基因片段,测序结果该片段长286bp。利用RACE方法,扩增了该基因的3’和5’末端。该基因全长1485bp,其碱基序列与拟南芥多聚半乳糖醛酸酶有83%的相似性。该基因的起始密码子ATG位于第67位,终止密码子为TAA,位于第1329位,ORF为1263 bp,编码420个氨基酸,与拟南芥从花蕾的cDNA文库获得的编码的多聚半乳糖醛酸酶的氨基酸序列相似性最高,为79%。BCMF2编码的蛋白质的分子量为43844.28道尔顿:等电点为8.203;pH 7.0时的电荷为6.050。系统进化树分析表明,该基因与其它植物的花粉、花药特异PG酶基因聚为一类。更多还原