恶性疟原虫顶端膜抗原1可调控性表达的初步研究

【作者】 雷俊川； 缪军； 李珣； 薛采芳； 刘忠湘； 王宪锋；

【机构】 第四军医大学病原生物学教研室；

【摘要】 <正> 目的:对恶性疟原虫顶端膜抗原1(Apical Membrane Antigen 1 AMA-1)在小鼠体内的可调控性表达作初步研究。材料与方法:①构建真核表达载体pTL-8/AMA-1(rtTA 型),质粒tTS(tetracycline-dependent transcriptional silencer)由缪军主任从德国带回;②用QIAGEN公司的质粒纯化柱大量制备了质粒pTL-8/AMA-1(rtTA型)和质粒tTS;③选取清洁级BALB/c雌性小鼠(6至8周龄)每组5只,麻醉后于双侧股四头肌、胫骨前肌共四个点,每点注射DNA-PBS溶液50μl,含质粒pTL-8/AMA-1(rtTA型)200ug、质粒tTSug;④分别于免疫后2、4、6、8周小鼠尾静脉采血分离血清,ELISA测定抗体OD值。结果:①成功构建了真核表达载体pTL-8/AMA-1(rtTA型);②pTL-8/AMA-1(rtTA型)单独免疫组均产生了显著的抗AMA1抗体应答,血清1:100稀释后抗体OD值高达1.9:③质粒pTL-8/AMA-1(rtTA型)和质粒tTS共同免疫组小鼠抗体OD值在第二周和第四周更多还原