细胞因子编码质粒对疟疾DNA免疫的调节作用

【作者】 李珣； 缪军； 薛采芳； 雷俊川； 王宪锋； 刘忠湘；

【机构】 第四军医大学病原生物学教研室；

【摘要】 <正> 目的:探讨细胞因子基因佐剂对疟疾DNA疫苗的免疫增强作用,以及对宿主免疫应答类型的调节作用。材料与方法:□体外培养恶性疟原虫,提取基因组DNA,PCR扩增AMM1胞外域编码基因,测序确证后克隆到DNA疫苗载体VR1020中;□分别构建编码小鼠细胞因子GM-CSF、IL-4和IL-12的真核表达质粒,构建双顺反子质粒pGM-CSF/pTPA-E:□选取清洁级BALB/c雌性小鼠(6至8周龄)每组5只,麻醉后于双侧股四头肌、胫前肌每点注射DNA-PBS溶液50μl,每种质粒的总量为100μg,3周后重复接种一次;④分别于第2和5周自小鼠尾静脉取血分离血清,ELISA测定总IgG以及Igg1和IgG2a亚类滴度;⑤制备脾细胞悬液,用重组更多还原