Hsp90在细胞氧化应激耐受中的作用

【作者】 陈雪梅； 邹飞； 陈斯泽； 罗炳德； 万为人； 王斌；

【机构】 第一军医大学高温医学研究室；

【摘要】 <正> 目的:进一步阐明分子伴侣Hsp90在氧化应激耐受中的保护作用机制。方法:将合人Hsp90β序列的质粒pSmycHSP经亚克隆、纯化后,用电穿孔法(Gene Pulser ⅡElectroporation,Bio-Rad,975 uF,0.21 kV,20 ms)转染到成纤维细胞系NIH-3T3细胞内,经G418(500μg/ml)筛选出阳性单克隆。以高温处理(44℃,30 min)模拟细胞氧化应激状态,分别以正常、预适应(42℃,20 min,6 h后处理)NIH-3T3细胞为对照;用细胞计数、PI染色的流式细更多还原