DNA探针聚合酶链反应免疫发光技术监测蚊媒体内班氏丝虫幼虫

【作者】 郑惠君； 陶增厚； 程文芳； 陈宪； Sen Dissanayake； Willy F.Piessens；

【机构】 贵州省寄生虫病研究所； 美国哈佛大学公共卫生学院热带病学系；

【摘要】 <正> 我们制备班氏丝虫种特异性DNA探针,应用寡核苷酸作为聚合酶链反应(PCR)的引物,能放大班氏丝虫种特异性具有重复的碱基序列的DNA380和650bp片段,在班点印渍法实验中,用生物素标记班氏丝虫DNA探针杂交,通过光化学反应检测班氏丝虫幼丝虫DNA的量为lng～2ng。经PCR放大后能检测蚊体内1条微丝蚴或1/2条Ⅲ期幼丝虫,其敏感性与32P放射性同位素标记的DNA探针相当。对蚊体内的马来丝虫、犬恶丝虫、牛腹腔丝虫和微丝蚴均为阴性反应,说明具有种特异性,且经3次更多还原