日本血吸虫Mf1和胞质氨基肽酶基因的亚克隆表达与免疫保护效果测定

【作者】 王庆林； 易新元； 曾宪芳； 罗新松； 何永康； 彭兴华；

【机构】 承德医学院微生物与免疫学教研室； 中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室； 湖南省寄生虫病防治研究所； 中南大学湘雅医学院分子生物学中心；

【摘要】 目的:在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)Mf1蛋白和胞质氨基肽酶(cytosol aminopeptidase,CA),并对表达产物进行免疫保护效果测定。方法:将Sj Mf1基因和Sj CA基因亚克隆至pGEX-5X-3载体,转化入感受态大肠杆菌ER2688,在IPTG诱导下进行表达,表达产物免疫小鼠,免疫用抗原剂量为50μg/次/鼠,免疫3次后进行攻击感染,观察诱导产生的减虫效果。结果:在IPTG诱导下,表达载体中的Sj GST基因与重组的SjMf1基因和Sj CA基因在大肠杆菌中获得了高效表达,形成Sj GST-Mf1和Sj GST-CA融合蛋白,用这两种融合蛋白免疫小鼠,分别诱导产生了39.15%和26.57%的减虫率。结论:Sj Mf1和Sj CA基因亚克隆至pGEX-5X-3载体后可在大肠杆菌中高效表达,表达产物能诱导小鼠产生一定程度的抗Sj保护性免疫力。更多还原