Rev依赖性HIV感染细胞杀伤型质粒的表达

【作者】 施伟民；

【机构】 上海同济大学附属同济医院皮肤性病科；

【摘要】 目的 检测由HIV调节蛋白Rev与Rev反应区（REE）的高亲和性合成的一种不受变异影响的,能特异地直接使病毒感染细胞转换成免疫原结构的表达与功能。 方法 采用基因枪转导流式细胞仪检测新质粒的表达功能。 结果 新结构pDM128-TNFR1（pT128）经酶切法及PCR法检测,TNFR1基因完整地存在于pT128。新质粒具有特异地选择性表达作用,即 Rev存在时,pT128表达TNFR1（p<0.01）,单纯pT128不能表达（p>0.01）。同样pT128与pAD8共转时才能表达TNFR1（p<0.01）,单纯pT128无表达作用（p>0.01）。pT128与pAD8存在才表达TNFR1并有明显的杀伤靶细胞作用,绿荧光表达Hela细胞数明显低于对照组（p<0.01）。 pT128与pRev或AD8共转,其TNFR1表达能力不及单纯Hu p60 TNFR1 in pDC302（p<0.01）。pT128与pRev或AD8在人类正常的角质生成细胞中能被激发并合成TNFR1杀伤宿主细胞,也有良好的细胞杀伤作用（p<0.01）。 结论 pT128是一种潜伏态的、对宿主细胞无伤害作用的、能选择性地被激活的结构,能特异性地杀伤HIV感染的宿主细胞。更多还原