多重PCR法用于D-K型沙眼衣原体基因分型的研究

【作者】 刘全中； 陈锦英； 缴稳苓； 田静群； 傅志宜；

【机构】 天津医科大学总医院；

【摘要】 目的 摸索一套泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型的多重PCR法。 方法 选择某一型与其它各型均不同的可变区部位作为下游引物,而以恒定区1区的高度保守区作为各亚型的公用上游引物,优化反应条件,进行标准株和临床野生株的多重PCR扩增,并与PCR-RFLP方法比较。 结果 用摸索出的反应系统和条件,对8个标准株进行扩增,扩增出与理论值一致的片段,并可直接在普通水平琼脂糖凝胶进行电泳。特异性检测证明:（1）衣原体各型之间没有非特异性交叉扩增,（2）对泌尿生殖道病原和寄生微生物进行扩增,未扩出任何DNA带。对临床野生株分型结果证明:复合PCR阳性率为100％,而PCR-RFLP为94.44％。 结论 本套衣原体因分型的多重PCR法特异,敏感、快速、实用、最终能用于临床分型。更多还原