禽大肠杆菌病免疫保护机理的研究

【作者】 高崧； 彭大新； 文其乙； 吴艳涛； 甘军纪； 焦新安； 滕峰； 刘文博； 张如宽； 刘秀梵；

【机构】 扬州大学畜牧兽医学院动物医学系；

【摘要】 以禽病原性大肠杆菌O₁₈、O₇₈分离株制成超声波裂解铝佐剂苗免疫,疫苗的含菌量为3×10⁹菌落形成单位（CFU/ml）,免疫14日龄鸡,0.5ml/羽,免疫21天后,所有试验鸡编号,翅静脉采血,分离血清,置-20℃备用;以血清型内、外相同或不同外膜蛋白型（Outer membrane proteinpattern, OMP型）的O₁₈、O₇₈分离株攻毒,攻毒时以各分离株LB肉汤18小时静置培养物（每毫升约含10⁹CFU）胸部肌肉注射,1ml/羽,攻毒后死亡鸡按编号登记、剖检并作细菌分离,攻毒10天后,存活鸡扑杀,同上采集血清,剖检同时作细菌分离。攻毒结果表明:O₇₈血清型内相同、不同OMP型的分离株间能获得最大保护（免疫效力≥82.4％）;O₁₈血清型内相同OMP型分离株间能获得最大保护（72.7％）,而不同OMP型分离株间不能保护（免疫效力为5.6％）;上述2个血清型的分离株间不论OMP型是否相同,均缺乏保护（免疫效力≤27.2％）。 应用首次建立的OMP抗体的ELISA检测方法,测定了试验鸡临攻毒前针对大肠杆菌OMPs的抗体滴度;同时,应用常规间接血凝试验（indirect hemagglutination test, IHT）测定了试验鸡临攻毒前针对大肠杆菌脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）抗体。结果表明:免疫组鸡血清中上述两种抗体明显高于攻毒对照组;在免疫组,存活鸡临攻毒前血清中上述两种抗体滴度恒高于死亡鸡,但除3个组外,多数组差异不显著;攻毒对照组这一关系不稳定。 以上结果说明,禽大肠杆菌病的免疫保护,主要与O血清型有关,部分与OMP型有关,如O₁₈分离株;禽源性大肠杆菌的免疫保护性抗原含OMPs、LPS等多个抗原表位。更多还原