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恶性疟原虫乳酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定
【机构】 第一军医大学热带医学研究所;
【摘要】 <正> 利用PCR技术特异性扩增恶性疟原虫海南株(FCC1/HN)乳酸脱氢酶基因,经双酶切后克隆入pGEX-4T-1表达载体中,在大肠杆菌中表达恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHpf)与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白。经凝胶光密度图像分析系统检测,融合蛋白约占菌体总蛋白的12.96%。菌体经超声波破菌,发现目的蛋白出现在沉淀中,因此目的蛋白是以包涵体的形式表达。用3mol/L尿素反复洗涤包涵体,能洗去一部分杂蛋白,此时蛋白纯度为30.23%。经制备电泳纯化后,纯度达81.1%。将工程菌表达产物经SDS-PAGE后,转移至硝酸纤维素膜上,以兔抗恶性疟原虫血清进行
- 【会议录名称】 中国原生动物学学会第十一次学术讨论会论文摘要汇编
- 【会议名称】中国原生动物学学会第十一次学术讨论会
- 【会议时间】2001-10
- 【会议地点】中国武汉
- 【分类号】R346
- 【主办单位】中国原生动物学学会(Chinese Protozoological Society)