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抗菌肽-人溶菌酶融合基因的构建及转入锦橙后的表达分析

Construction and Expression Analysis of Cecropin B and Human Lysozyme Fusion Gene in Transgenic Citrus

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【作者】 解栋梁； 邹修平； 许兰珍； 何丹丹； 彭爱红； 何永睿； 陈善春；

【Author】 XIE Dongliang;ZHOU Xiuping;XU Lanzhen;HE Dandan;PENG Aihong;HE Yongrui;CHEN Shanchun;College of landscape architecture,Southwest University;Citrus Research Institute,Chinese Academy of Agriculture Sciences/National Center for Citure Variety Improvement;

【机构】 西南大学园艺园林学院； 中国农业科学院柑桔研究所； 西南大学柑桔研究所； 国家柑桔品种改良中心；

【摘要】 为了研究抗菌肽和人溶菌酶对柑桔溃疡病和黄龙病等的协同抗性,利用连接多肽2A编码序列连接抗菌肽cecropin B(CB)和人溶菌酶human lysozyme(HLy)基因,构建了融合基因CB:HLy及其超量表达载体p35S::CB:HLy。利用农杆菌介导法,将该载体转化至锦橙上胚轴。通过GUS化学染色及PCR鉴定,获得转基因植株32株。Real-time PCR证明了融合基因在转基因锦橙中得到了高效表达。本研究为柑桔溃疡病的抗性研究提供了材料。

【Abstract】 To investigate the synergy resistance of antibacterial peptide and human lysozyme to citrus canker and HLB,we constructed a CB:HLyfusion gene and its overexpression vector p35S::CB:Hly using one linker polypeptide 2A.This vector was introduced into sweet orange genome(Citrus sinensis Osbeck)by Agrobacterium-mediated transformation.Thirty-two transgenic plants were confirmed by GUS chemical staining and PCR analysis.Real-time PCR showed that this fusion gene had high expression levels in the transgenic citrus.This study provided the materials for research on resistance to citrus canker in the future.

【关键词】 抗菌肽； 人溶菌酶； 融合基因； 连接多肽2A； 遗传转化；
【Key words】 antimicrobial peptides； human lysozyme； fusion gene； linker polypeptide 2A； genetic transformation；
【基金】 国家自然科学基金项目(31272150);中央高校基本科研业务费专项(XDJK2014A018);国家科技支撑计划课题任务书(2012BAD19B06);重庆应用开发项目(CSTC2013yykfA8002);柑桔学重庆市市级重点实验室开放基金计划项目(CKLC201105)资助
  • 【文献出处】 中国南方果树 ,South China Fruits , 编辑部邮箱 ,2015年02期
  • 【分类号】S666.4
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】139
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