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PCR技术快速检测玉米内州萎蔫病菌研究

PCR for rapid identification of Clavibacter michiganensis subsp. nebraskensi

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【作者】 周琦陈寔高文娜汪万春李建光陈洪俊李健强

【Author】 .Zhou Qi1,Chen Shi2,Gao Wenna1,2,Wang Wanchun1,Li Jianguang1,Chen Hongjun1,Li Jianqiang2(1.Beijing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Beijing 100026,China;2.China Agricultural University,Key Laboratory of Plant Pathology,Ministry of Agriculture P.R. Beijing 100193,China;3.Institute of Animal and Plant Quarantine,CAIQ,Beijing 100029,China)

【机构】 北京出入境检验检疫局中国农业大学农业部植物病理学重点开放实验室中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所

【摘要】 玉米内州萎蔫病是北美玉米生产中的严重病害,为防止其传入我国,本研究采用Clavibacter michiganensis不同亚种的转录间隔区序列,设计了特异性的PCR引物,对C.michiganensis种下不同亚种的DNA进行了PCR扩增反应,结果表明,只有玉米内州萎蔫病菌的特异性扩增得到大小为170bp的目标片段,且仅有此一条明显的PCR扩增产物,C.michganensis种下其他亚种无扩增产物。PCR反应的灵敏度为4.36×105cfu/mL和1.56×102pg,可以满足检疫的要求。

【Abstract】 Goss’s Bacterial Wilt and Leaf Blight of Corn is a kind of severe disease occurring in the corn production in the North America.To avoid its entry into China,the intergenic transcribed spacer of Clavibacter michiganensis was analyzed to design the PCR primer pairs,which was adopted in the PCR of different C.michiganensis subspecies.The result showed that only one DNA fragment was amplified when the template was C.m.nebraskensis,and no fragment was amplified when other subspecies DNA was used as templates.The sensitivity of the PCR was 4.36×105 cfu/mL and 1.56 ×102 pg,and this could meet the demand of daily quarantine.

【基金】 国家“十一五”重大科技支撑计划;“农林重大生物灾害防控技术研究”项目;“潜在入侵物种口岸侦测技术”(课题编号:2006BAD08A13);国家质检总局科技计划项目“检疫性植物病原细菌抗体荧光双标记纳米检测技术研究”(课题编号:2009IK251)
  • 【文献出处】 植物检疫 ,Plant Quarantine , 编辑部邮箱 ,2010年02期
  • 【分类号】S41-3
  • 【被引频次】6
  • 【下载频次】203
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