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应用多元PCR鉴定水体中大肠杆菌的毒素基因

Detection for Virulence Genes of Escherchia coli Isolates Recovered from Water Body Using Multiplex PCR

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【作者】 关怡黄天培潘洁茹

【Author】 Guan Yi 1,Huang Tianpei 1,Pan Jieru 2(1 School of Life Sciences,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002;2 Fuzhou Center for Disease Control and Prevention,Fuzhou 350004)

【机构】 福建农林大学生命科学学院福州市疾病预防控制中心

【摘要】 根据已发表的大肠杆菌(Escherchia coli)毒素基因序列,针对大肠杆菌的8种毒素基因设计特异引物并进行多元PCR扩增,检测某猪场排污口附近分离的16株大肠杆菌的毒素基因。结果表明,从16株待测样品中成功扩增出7个毒素基因,即fanA、fedA、aidA-1、stx2e、astA、fasA和sepA。其PCR产物大小与预期一致。在16个样品中,aidA-1的检出率最高,总共16株。其后依次为stx2e 9株,astA 8株,fanA 7株,sepA 2株,fedA和fasA各1株。实验成功验证了多元PCR技术的可靠性及其在水环境中大肠杆菌毒素基因检测的实用性。

【Abstract】 According to the published DNA sequences,eight pairs of specific oligonucleotide primers were designed to identify 8 virulence genes harbored by 16 Escherchia coli isolates recovered from water body of a pig farm using multiplex PCR method.7 virulence genes(fanA,fedA,aidA-1,stx2e,astA,fasA and sepA) were detected in the strains.All the strains harbored aidA-1 gene while stx2e,astA,fanA,sepA 2,fedA and fasA were detected in 9,8,7,2,1 and 1 strains.The study successfully demonstrated the reliability of multiplex PCR technique and its practicability in detection of virulence genes of E.coli within aquatic environment.

【关键词】 多元PCR大肠杆菌毒素基因
【Key words】 multiplex PCRE.colivirulence gene
【基金】 国家高技术研究发展计划“细菌、真菌类生物杀虫剂研究和创制”(2006AA10A212);福建省高校服务海西建设重点项目“现代绿色农业技术与分子生态工程”(闽教高(2009)8号);福建省青年科技人才创新项目“苏云金菌素对霍乱弧菌等食源性病原细菌及其生物膜的作用”(2009J505165)和“苏云金芽孢杆菌功能基因inhA的研究”(2006F3016);福建省重点引智项目“苏云金芽孢杆菌防治登革热主要媒介害虫的研究”(SZ2007035)
  • 【文献出处】 中国农学通报 ,Chinese Agricultural Science Bulletin , 编辑部邮箱 ,2010年16期
  • 【分类号】R115
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】95
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