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人血清中小分子蛋白质分离电泳方法改进

Separation of micro molecular protein in human serum with improved Tricine-SDS-PAGE system

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【作者】 韦霄何敏农炳金蒋智华覃健张志勇

【Author】 WEI Xiao,HE Min,NONG Bing-jin,et al.Gangxi Center For Disease Control and Prevention(Nanning 530021,China)

【机构】 广西疾病预防控制中心广西医科大学医学科学实验中心广西医科大学公共卫生学院广西医科大学公共卫生学院 南宁530021

【摘要】 目的建立一种灵敏易行分离分子量<10000 Da低丰度蛋白质的电泳方法。方法用Hitrap Blue层析柱去除血清中白蛋白,用U9对血清样品进行变性处理,采用改进后的方法(0.1%甲醇,0.5%三氯乙酸,0.1%考马斯亮蓝G250)进行染色。结果经去除血清中的白蛋白、对样品进行变性处理及改进染色方法后,分辨率和灵敏度明显提高,可有效分离10000 Da以下的小分子蛋白质。结论改进后的电泳方法,不仅简便灵敏,而且还有利于蛋白质的洗脱回收。

【Abstract】 Objective To separate less abundant proteins less than(10 000) Da with an effective Tricine-SDS-PAGE system.Methods The human serum albumin was removed by Hitrap Blue column,and serum was dealed with U9.Then gel was stained by the improved method(0.1% carbinol,0.5% TCA,0.1%Coomassie briliant blue G250).Results The discovery and detection of less abundant proteins less that(10 000) Da were improved obviously by removal of human serum albumin,serum treated with U9 and improvement of staining.Conclusion The improved Tricine-SDS-PAGE system is not only effective to resolve these less abundant proteins less than(10 000 Da,)but also favourable to recover these proteins from gel.

【关键词】 聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质分离
【Key words】 SDS-PAGEproteinseparation
【基金】 广西科学基金项目(桂科攻0322025-2桂科攻0428005-12)
  • 【文献出处】 中国公共卫生 ,Chinese Journal of Public Health , 编辑部邮箱 ,2007年04期
  • 【分类号】R341
  • 【被引频次】12
  • 【下载频次】757
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