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大豆叶片全长cDNA文库的构建与鉴定

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【作者】 董志敏； 李英慧； 张宝石； 关荣霞； 常汝镇； 邱丽娟；

【机构】 沈阳农业大学农学院； 中国农业科学院作物科学研究所； 沈阳农业大学农学院；

【摘要】 以大豆绥农14第一个三出复叶幼叶为材料提取mRNA,利用SMART技术合成了全长cDNA,经限制性内切酶SfiA和SfiB消化后的cDNA克隆到质粒载体pDNR-LIB中,建成大豆叶片全长cDNA文库。文库容量1·2×106,重组率接近100%。对随机挑取的克隆进行菌液PCR鉴定,插入片断大小范围为0·25~2·0kb,主要集中在0·5~1·5kb,插入片断平均大小为0·9kb,这说明文库质量可保证大规模全长cDNA的获得。

【关键词】 大豆； 叶片； SMART； 全长cDNA文库；
【基金】 国家自然科学基金重大项目(30490250);国家“863”计划项目(2003AA207060)
  • 【文献出处】 作物杂志 ,Crops , 编辑部邮箱 ,2006年05期
  • 【分类号】S565.1
  • 【被引频次】25
  • 【下载频次】269
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