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人TLR-2胞外肽段的分段表达及其活性鉴定

Prokaryotic expression and binding activity of different extracellular fragments of human TLR-2

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【作者】 刘艳君； 罗冰； 赵文忠； 朱平； 富宁；

【Author】 LIU Yan-jun~(1),LUO Bing~(1),ZHAO Wen-zhong~(2),ZHU Ping~(1),FU Ning~(1)(1.Department of Immunology,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China;2.Department of Microbiology,Medical School of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China)

【机构】 南方医科大学免疫学教研室； 中山大学医学院微生物学教研室； 南方医科大学免疫学教研室 广州510515； 广州510515； 广州510080；

【摘要】 为深入研究TLR-2胞外肽段不同区域在配基识别过程中的功能,对TLR-2a(7M-225E)、TLR-2b(185L-392L)、TLR-2c(436E-595C)三个小片段进行克隆及原核表达,其中TLR-2a和TLR-2c得到成功克隆和表达,活性鉴定结果显示TLR-2a与商品抗TLR-2(179L-204I)多抗和抗His单抗反应良好,TLR-2c可以与抗His单抗反应,在配基结合实验中TLR-2a和TLR-2c都可与PGN和LTA结合,提示TLR-2对配基的识别为构像识别。

【Abstract】 In order to investigate the role of different extracellular fragments of TLR-2 in ligand recognition,three short fragments named as TLR-2a(7M-225E),TLR-2b(185L-392L),and TLR-2c(436E-595C) were cloned and expressed in prokaryotic expression system.Recombinant proteins TLR-2a/His and TLR-2c/His were successfully purified from inclusion body.TLR-2a could bind with polyclonal antibody(TLR-2 against 179L-204I,Ab-1) and anti-His antibody,while TLR-2c could react with antiHis antibody only.These results of ligand-binding assay indicate that both TLR-2a and TLR-2c can bind with PGN and LTA which are known as the important ligands from bacteria to TLR-2.

【关键词】 TLR-2肽段； 原核表达； 配基识别；
【Key words】 TLR-2 fragment； prokaryotic expression； ligand recognition；
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30400404);广东省自然科学基金资助项目(020017)
  • 【文献出处】 现代免疫学 ,Current Immunology , 编辑部邮箱 ,2006年04期
  • 【分类号】Q786
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】120
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