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抗人前列腺素D合成酶嵌合抗体基因的构建

Constructing Human-mouse Chimeric Antibody Gene to L-PGDS

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【作者】 朱国华； 陈德宇； 许晓风； 黄宇烽；

【Author】 Zhu Guohua~(1,2), Chen Deyu~2, Xu Xiaofeng~1, Huang Yufeng~2(1.School of Life Science,Nanjing Normal University, 210097, Nanjing, China) (2.Laboratory of Reproduction and Genetics, Nanjing General Hospital of Nanjing Command PLA, 210002, Nanjing, China)

【机构】 南京师范大学生命科学学院； 南京军区南京总医院生殖遗传室； 南京军区南京总医院生殖遗传室 210097； 江苏； 南京南京军区南京总医院生殖遗传室； 210002； 南京； 210097； 南京；

【摘要】 采用RT PCR技术,从 1株稳定分泌抗人L-PGDS单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞中扩增抗体的可变区基因,得 2个Vκ和 1个VH.序列经Igblast比对分析,其中 1个Vκ为鼠骨髓瘤细胞系内固有的无功能基因;另一Vκ和VH具备鼠抗体可变区特征,为抗体功能基因.经双酶切,将抗体可变区功能基因分别与表达载体pAG4622、pAH4604中的人IgG相应恒定区相连,构建成抗人L-PGDS的人 鼠嵌合抗体基因.

【Abstract】 The variable region genes of L-PGDS McAb are amplified from hybridoma cells by RT-PCR. After sequenced, one VH and two Vκ are obtained. But one of the Vκ is an aberrant Vκ transcript, derived from myeloma cell line. The other VH and Vκ are functional genes, for they are highly homologous to the variable region genes of murine immunoglobulin. Making use of enzymatic digestions, the VH and Vκ are joined to pAG4622 and pAH4604 to construct L-PGDS human-mouse chimeric antibody genes.

【关键词】 人LPGDS； 单克隆抗体； 可变区基因； 人鼠嵌合抗体；
【Key words】 human Lipocalin-type prostaglandin D synthase； monoclonal antibody； variable region genes； human-mouse chimeric antibody；
【基金】 中国人民解放军九五计划生育基金资助项目(军计生 98-04).
  • 【文献出处】 南京师大学报(自然科学版) ,Journal of Nanjing Normal University(Natural Science Edition) , 编辑部邮箱 ,2005年01期
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】74
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