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人腺病毒3型六邻体基因的克隆与鉴定

Cloning and characterization of hexon gene of human adenovirus type 3

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【作者】 侯咏刘佳郭彩玲金玉霞曲章义

【Author】 HOU Yong, LIU Jia, GUO Cail-ling, JIN Yu-xia, QU Zhang-yi (Department of Microbiology, Harbin Medical University, Harbin 150086, China)

【机构】 哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室 哈尔滨150086哈尔滨150086哈尔滨150086

【摘要】 目的 克隆人腺病毒 3型 (Ad3)六邻体 - L 1(Hexon- L 1)、六邻体 - L 2 (Hexon- L 2 )区基因 ,构建含有该基因的重组质粒 ,并进行测序鉴定 ,为进一步构建表达载体 ,制备基因工程疫苗打下基础。方法 从 Ad3感染的 He L a细胞中提取 Ad3DNA,用 PCR方法扩增 Hexon- L 1、Hexon- L 2基因 ,将得到的片段定向克隆到克隆载体 p U C19质粒中 ,对克隆片段进行 DNA测序鉴定。结果 构建了重组质粒 p UC19Hexon,测序结果与 Genebank中该序列进行同源性比较证明克隆的片段为 Ad3六邻体序列。结论 成功克隆了 Ad3的 Hexon- L 1、Hexon- L 2区基因。

【Abstract】 Objective To clone the Hexon-L1、Hexon-L2 gene of human adenovirus type 3 for constructing the expression recombinant plasmid and producing genetic engineering vaccine to prevent the adenovirus infection.Methods Ad3 DNA was isolated and purifyied from the cultured HeLa cells.The Hexon fragment was amplified by polymerase chain reaction (PCR) method,and then cloned into vector pUC19 plasmid and charactered by restriction enzyme digestion and sequencing.Results The recombinant pUC19Hexon was constructed. Meanwhile,it was demonstrated that the cloned fragement was Ad3 Hexon sequence indeed by aligning with the sequence of Ad3 in genebank.Conclusions The Ad3 Hexon-L1, Hexon-L2 gene are cloned successfully.

【关键词】 3型腺病毒六邻体克隆重组质粒
【Key words】 adenovirus type 3Hexoncloningrecombinant plasmid
【基金】 中国医学科学院青年基金资助项目 (93 3 10 14 )
  • 【文献出处】 中国地方病学杂志 ,Chinese Journal of Endemiology , 编辑部邮箱 ,2003年03期
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】17
  • 【下载频次】191
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