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农杆菌质粒DNA提取方法的改良与鉴定

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【作者】 单世华； 李春娟； 张君诚； 庄伟建；

【机构】 福建农林大学作物科学学院； 福建农林大学作物科学学院 福州福建350002； 福州福建350002； 福州福建350002；

【摘要】 常规的农杆菌质粒DNA提取常采用碱裂解和酚、氯仿提纯方法 ,得率较低 ,一般在 5 0ng μl以下。针对常规碱裂解法的不足 ,利用含有pCGⅡ双价载体的LBA4 4 0 4菌株通过增加菌液收集量、改变提取流程中的反应条件等对常规方法进行了改良 ,去除了酚、氯仿提纯过程 ,减少了提取过程对人体的伤害 ,得率一般在 0 .5～ 2 μg μl。所提取质粒DNA可直接用于PCR、限制性酶切等分子生物学试验

【关键词】 根癌农杆菌； 质粒DNA提取； 改良；
【基金】 福建省科技厅国际合作项目
  • 【文献出处】 生物技术 ,Biotechnology , 编辑部邮箱 ,2003年02期
  • 【分类号】Q933
  • 【被引频次】38
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