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猪瘟病毒p80基因NTPase/RNA解旋酶功能区在E.coli中的表达

Expression of NTPase/RNA Helicase Functional Domain of p80 Gene of C SFV in E.coli

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【作者】 庄淑珍; 刘湘涛; 韩雪清; 张彦明; 张永国; 薛青红; 冯卫权; 谢庆阁;

【Author】 ZHUANG Shu-zhen1,2,LIU Xiang-tao1, HAN Xue-qing1,ZHANG Yan-min2,ZHANG Yong-guo2,XUE Qing-hong2,FENG Wei- quan3,XIE Qing-ge1(1Lanzhou Veterinary Research Ins titute,Gansu, Lanzhou 730046,Chin a;2North-Western Sci-tech Univers ity of Agriculture and Forestry,Sh aanxi,Yangling 712100,China;3Shenzhen Veterinary and Health Prevention In stitute,Guangdong,Shenzhen 51800 8,China)

【机构】 中国农业科学院兰州兽医研究所; 西北农林科技大学畜牧兽医学院; 深圳市兽医卫生防疫检疫所; 中国农业科学院兰州兽医研究所 甘肃兰州 730046; 陕西杨凌 712100; 甘肃兰州 730046; 深圳 518008; 甘肃兰州 730046;

【摘要】 采用PCR技术扩增出猪瘟病毒GXYL株和C株p80基因的NTPase/RNA解旋酶功能区(sGXNS3和sCNS3),将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET-sGXNS3和pET-sCNS3。PCR、酶切和序列分析鉴定目的基因插入位置、方向和读码框完全正确。1 0mmol/LIPTG诱导得到分子量为26kD的目的蛋白,Westernblot检测表明,表达的目的蛋白能被CSFV阳性血清识别。

【Abstract】 Partial NTPase/RNA helicas e functional domain of p80 genes o f CSFV GXYL strain and C strain (s GXNS3 and sCNS3) were amplified by PCRThe recombinant plasmids pET-s GXNS3 and pET-sCNS3 were obtained after being cloned them into expre ssion vector pET-30a(+)The inserted position,the orientation and the O RF were all correct by PCR,restriction enzyme digestion and sequence anal ysisThe 26kD target proteins were produced by inducing with 1mmol/L IPTGWestern-blotting showed that the expressed proteins could be re cognized by CSFV positive serum

【基金】 国家重点基础研究发展规划(G1999011905)
  • 【文献出处】 病毒学报 ,Chinese Journal of Virology , 编辑部邮箱 ,2003年03期
  • 【分类号】S852.65
  • 【被引频次】6
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