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大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白的研究

The expression analysis of recombinant protein in \%Escherichia coli BL21 (DE3).

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【作者】 陆海； 吴薇； 曾庆银； 李义； 蒋湘宁； 王沙生；

【Author】 Lu Hai; Wu Wei; Zeng Qingyin; Li Yi; Jiang Xiangning; Wang Shasheng. College of Biology, Beijing For. Univ., 100083, P.R.China.\;

【机构】 北京林业大学生物科学与技术学院； 吉林大学生命科学学院； 美国康涅狄克大学； 北京林业大学生物科学与技术学院；

【摘要】 为了研究在大肠杆菌BL2 1(DE3)中重组蛋白的表达特点 ,探讨重组蛋白在大肠杆菌中表达时可溶性蛋白与包涵体出现的特点 ,从表达载体中表达了植物ACC合成酶 .经SDS PAGE电泳与双波长扫描分析 ,确定目的蛋白随表达时间、菌液密度的增加而增加 .但是其最佳表达时间为 2 5h ,菌液密度OD6 0 0 为 0 6 ,IPTG的最佳浓度为 0 6mmol L ,此时目的蛋白含量占全菌蛋白含量之比最高 .植物ACC合成酶在大肠杆菌中表达时以包涵体的形式存在 ,未能检测到可溶性蛋白的表达

【Abstract】 In order to research the expression of recombinant protein in \%Escherichia coli \%plant,ACC synthase was expressed with expression vector in \%E.coli\%(BL21).Using SDS\|PAGE and wave length\|scan system,the expressed protein was found increasing with the increase of time,bacteria density and IPTG density.The best expressed time was two and half hours,and the protein was expressed highly at bacteria density of \%OD\% 600 =0 6 with 0 6mmol/L IPTG.The expression of solubility protein with SDS\|PAGE electrophoresis was not found.

【关键词】 ACC合成酶； SDSPAGE； 包涵体；
【Key words】 ACC synthase； SDS PAGE； inclusion body；
【基金】 国家自然科学基金重点项目 ( 39730 35 0 )资助
  • 【文献出处】 北京林业大学学报 ,Journal of Beijing Forestry University , 编辑部邮箱 ,2001年06期
  • 【分类号】Q784;Q786
  • 【被引频次】84
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