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Cre-lox重组系统介导转基因烟草中外源基因删除的研究

Cre/loxP-mediated Deletion of Transgene in Transgenic Tobacco

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【作者】 甄伟汪阳明丁伟陈溪胡鸢雷林忠平

【Author】 ZHEN Wei WANG Yangming\ DING Wei\ CHEN Xi\ Hu Yuanlei\ LIN Zhongping (National Laboratory of Protein Engineering and Plant Genetic Engineering,Peking University,Beijing,100871)

【机构】 北京大学蛋白质及植物基因工程国家重点实验室!北京100871现在单位:北京大学医学部心血管研究所北京100083100871北京大学蛋白质及植物基因工程国家重点实验室!

【摘要】 对Cre在转基因个体中介导的重组效率进行了研究。构建了含有Cre基因 (p35S Cre)和GUS基因侧翼含同向loxP位点的 (loxP p35S GUS loxP)两种植物表达载体。以共转化的技术将两种基因元件同时转化烟草得到转基因植株 ,根据对共转化植株GUS基因的活性分析、分子检测、PCR检测及对重组后扩增DNA片段进行序列分析表明 :Cre loxP重组系统在转基因烟草中能精确高效地介导转基因的删除 ,但也存在部分植株不能完全删除的现象。

【Abstract】 In the present study,we develop an efficient method to be used to examine recombination efficiency of transgenic plantlet.Two constructs,one containing Cre recombinase under the control of 35 S promoter (p35S/Cre) and the other containing a \%uidA\% gene driven by 35 S promoter flanked by loxP site (loxP/35S/GUS/loxP),were simultaneously introduced into tobacco by cotransformation method.The results show that Cre loxP system can precisely and efficiently direct deletion of transgene based on Gus assay,PCR analysis and sequence of recombination DNA fragment,but also find that incomplete deletion exist in partial plant.

【基金】 高等学校博士学科点专项科研基金资助项目
  • 【文献出处】 北京大学学报(自然科学版) ,Acta Scicentiarum Naturalum Universitis Pekinesis , 编辑部邮箱 ,2001年04期
  • 【分类号】Q784
  • 【被引频次】25
  • 【下载频次】377
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