人纺锤体素cDNA的克隆、定位和组织表达谱分析

【摘要】 纺锤体是细胞有丝分裂及配子成熟分裂过程中特有的亚细胞结构，它的结构和功能的正常与否直接影响生物个体的发育、分化、生长和繁殖．最近的研究表明，小鼠Ｍｏｓ／ＭＡＰＫ途径对纺锤体的作用与纺锤体素（ｓｐｉｎｄｌｉｎ）蛋白的磷酸化过程密切相关．采用同源筛选方法从人睾丸ｃＤＮＡ分子库中克隆到一个与小鼠纺锤体素基因（ Ｓｐｉｎ）编码序列高度同源，长 １９２９ｂｐ的 ｃＤＮＡ片段．计算机软件分析发现，该 ｃＤＮＡ的 ２７１－９８４ ｎｔ是一个完整的开放阅读框（ＯＲＦ），由其编码的 ２３７个氨基酸与小鼠Ｓｐｉｎ蛋白的氨基酸序列呈９６％的高度同源，并与小鼠的配子发生特异转录的相关蛋白 Ｓｓｔｙ也有 ５ ６％的同源度．经查新证实它是一个全新的基因编码序列后，以 ＳＰＩＮ（ｈｕｍａ ｓｐｉｎｄｌｉｎ）命名在 ＧｅｎＢａｎｋ登录（ ＡＦ０８７８６４）． Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果显示：该基因在人体卵巢、睾丸、心、脑。肾、胰腺、胎盘、脾脏中以 ４．８ ｋｂ的转录本表达，但在睾丸组织中还特有一个长约 ２．０ ｋｂ的转录本表达．然而在胸腺、小肠未见明显的杂交条带．应用ＲＨ制图方法，揭示ＳＰＩＮ基因定位于９号染色体９ｑ２２．１～２２．３区带．更多还原