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抗卵巢癌单链免疫毒素的载体构建及高效表达

Vector construction and high level expression of single chain immunotoxin against ovarian carcinoma

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【作者】 尤芳蕾冯捷成夜霞钱和年周萍叶雪

【Author】 YOU Fang Lei, FENG Jie, CHEN Ye Xia, QIAN He Nian, ZHOU Ping, YE Xue (Department of Gynecologic Oncology, Peking University People’s Hospital, Beijing 100044, China)

【机构】 北京大学人民医院妇科肿瘤实验室!北京100044

【摘要】 目的 :构建抗卵巢癌单链抗体 183B2 ScFv与假单孢外毒素 (peudononasexotoxin ,PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白 183B2 ScFvPE38,为卵巢癌导向治疗打下基础。方法 :采用基因工程技术 ,经过 3次亚克隆 ,将编码单链抗体的基因及编码毒素的基因亚克隆至原核表达载体pET30a(+ )上 ,并在IPTG的诱导下进行表达。采用直接ELISA及细胞杀伤对抗体及毒素部分的活性进行检查。结果 :表达蛋白183B2 ScFvPE38具有较好的抗体活性及毒素活性。结论 :抗卵巢癌单链免疫毒素 183B2 ScFvPE38具有良好的免疫学活性及生物学活性 ,可能有良好的应用前景

【Abstract】 Objective: To construct an expression vector for co_expression of single chain Fv antibody (OC183B 2) and peudomonas exotoxin(PE38). Methods: Clone the genes of ScFv (OC183B 2) and PE38 into PET30a(+) and then express the immunotoxin after induced with IPTG. Results: Liable activity of antibody and toxic in were both observed in the fusion recombinant protein. Conclusion: The recombinant fusion protein 183B 2ScFvPE38 keeps the activity of both components and may be of great use in the future to deal with ovarian carcinoma.

  • 【文献出处】 北京医科大学学报 ,JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY , 编辑部邮箱 ,2000年04期
  • 【分类号】R966
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】74
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