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草鱼生长激素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

THE DEVELOPMENT AND IDENTIFICATION OF HYBRIDOMA CELL LINES SECRETING MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST GRASS-CARP GROWTH HORMONE

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【作者】 杨峰； 樊震； 王远程； 陈松林； 贺路；

【Author】 Yang Feng Chen Songlin FanZhen HeLu Wang Yuancheng(Biotechnology Research Center, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081) (Changjiang Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shashi 434000)

【机构】 中国农业科学院生物技术研究中心； 中国水产科学研究院长江水产研究所； 中国水产科学研究院长江水产研究所 北京 100081； 北京 100081； 沙市 434000； 沙市 434000；

【摘要】 用经草鱼生长激素(gcGH)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/O-Ag14)融合,经3次克隆化培养和ELISA筛选,得到7株阳性杂交瘤细胞株,其中2株为强阳性。交叉试验表明,这些杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体(McAb)同大鳞大马哈鱼生长激素(sGH)、大鳞大马哈鱼促性腺激素(sGTH)及牛生长激素(bGH)均不起反应。小鼠腹水McAbs滴度高达1:1280000。受体-gcGH-McAb夹心试验表明,McAb确与有活性的gcGH有特异反应。用间接ELISA方法可检测到浓度为0.125#g/ml的gcGH。

【Abstract】 Monoclonal antibodies of hybridomas derived from fusing the mouse spleencytes immunized by gcGH with BALB / c mouse myeloma cells (Sp2 / 0-Agl4).Seven hybridomas cell lines were produced by indirect-ELISA screening and cloning for three times with limited dilution.In crossreaction test, these monoclonal antibodies didn’t react with sGH, sGTH and bGH. Antibody liter of ascitic fluids was about 1 : 1280000 in indirect-ELISA. In receptor-gcGH-McAb sandwich-ELISA test, monoclonal antibodies reacted with biological-active gcGH. GcGH can be detected at the concentration of 0.125 /μg/ ml in indirect-ELISA.

【关键词】 草鱼生长激素； 杂交瘤； 单克隆抗体；
【Key words】 Grass-carp growth hormone； Hybridoma； Monoclonal antibodies；
【基金】 国家自然科学基金资助项目
  • 【文献出处】 微生物学报 ,Acta Microbiologica Sinica , 编辑部邮箱 ,1996年01期
  • 【分类号】Q813.2
  • 【被引频次】2
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