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用多聚酶链式反应快速检测转化细胞中外源人凝血因子重Ⅸ cDNA
【摘要】 <正> 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)是利用人工合成的寡聚核苷酸引物和DNA多聚酶进行体外DNA扩增,这是近年迅速发展起来的分子生物学技术。这一技术已在基因诊断、突变检测、多态性研究和核苷酸顺序分析等方面得到应用。在基因转移和基因治疗中,常常有必要对转化细胞进行DNA分析,检测区分外源DNA和基因组DNA。常规用的方法不仅需要大量细胞,而且需要同位素标记的探针和Southern杂交,整个过程既麻烦又费时。本文介绍我们用PCR技术,对转有外源基因——人凝血因子IX cDNA的血友病B患者的原代皮肤成纤维细胞和其他转化细胞进行的直接检测和DNA分析。
【关键词】 多聚酶链式反应;
人凝血因子Ⅸ cDNA;
【基金】 国家高科技资助项目
- 【文献出处】 科学通报 ,Chinese Science Bulletin , 编辑部邮箱 ,1990年08期
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