樟树ISSR-PCR反应体系优化研究-中国学术期刊网络出版总库

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樟树ISSR-PCR反应体系优化研究

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【英文篇名】	Study on the Establishment of ISSR-PCR Reaction Conditions in Cinnamomum camphora
【下载频次】	★★★★☆
【作者】	邢建宏; 陈存及; 张国防; 彭东辉; 刘宝; 陈碧华;
【英文作者】	XING Jian-hong~1; CHEN Cun-ji~1; ZHANG Guo-fang~1; PENG Dong-hui~1; LIU Bao~1; CHEN Bi-hua~2(1.College of Forestry; Fujian Agriculture and Forestry University; Fuzhou; Fujian 350002; China; 2.Fujian Academy of Forestry; Fujian 350012; China);
【作者单位】	福建农林大学林学院; 福建省林业科学研究院福建福州; 福建福州;
【文献出处】	福建林业科技 , Journal of Fujian Forestry Science and Technology, 编辑部邮箱 2006年 03期期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	樟树; ISSR; PCR反应体系优化;
【英文关键词】	Cinnamomum camphora(L.)Presl; ISSR; PCR reaction condition;
【摘要】	以樟树基因组DNA为材料,分析了影响樟树ISSR-PCR的主要参数,确立了适用于樟树的ISSR反应体系和扩增条件。结果表明获得清晰、重复性高的樟树ISSR-PCR扩增条件为:20μL PCR反应体积中,1×PCR Buffer(10 mmol.L-1Tris.HCl,pH8.3,50 mmo.lL-1KCl),2.0 mmo.lL-1MgCl2,200μmol.L-1dNTPs,50 ng模板DNA,200 nmo.lL-1引物,0.5 UTaq DNA聚合酶。在扩增过程中,引物的适宜退火温度比其Tm值平均高3℃。这为今后利用ISSR标记技术开展樟树种间遗传多样性分析提供参考。
【英文摘要】	In this paper,the main parameters of affecting the result of ISSR-PCR amplification was analyzed using the materials of Cinnamomum camphora DNA and the optimal ISSR-PCR reaction condition in Cinnamomum camphora was established.The results showed that the optimum concentration of five important components i.e.MgCl_2,dNTPs,template DNA,primer,Taq DNA polymerase in 20 μL reaction system of ISSR was 2.0 mmol·L~-1,200 μmol·L~1,50 ng,200 nmol·L~-1 and 0.5 U,respectively.The appropriate annealing temperature was a...
【基金】	福建省林业厅种苗攻关项目(200306)
【更新日期】	2006-11-01
【分类号】	S792.23
【正文快照】	ISSR(Inter-simple sequence repeat),简单重复序列中间区域DNA标记技术是Zietkiewicz等创建的[1],该技术检测的是两个SSR(Simple Sequence Repeat)之间的一段短DNA序列上的多态性。其原理是根据真核生物基因组中广泛存在的简单重复序列,设计出各种能与SSR序列结合的PCR单一引?

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