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发根农杆菌介导的茶树发根高频诱导与遗传转化  
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【英文篇名】 Agrobacterium Rhizogenes-Mediated High Frequency Hairy Root Induction and Genetic Transformation in Tea Plant
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【作者】 张广辉; 梁月荣; 陆建良;
【英文作者】 ZHANG Guang-hui1; 2; LIANG Yue-rong1*; LU Jian-liang1(1.Department of Tea Science; Zhejiang University; Hangzhou 310029; China; 2.Xuzhou Higher Vocational School of Bioengineering; Xuzhou 221006; China);
【作者单位】 浙江大学茶学系; 浙江大学茶学系 浙江杭州; 江苏省徐州生物工程学校; 江苏徐州; 浙江杭州;
【文献出处】 茶叶科学 , Journal of Tea Science, 编辑部邮箱 2006年 01期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 茶树; 发根农杆菌; 发根培养; 遗传转化;
【英文关键词】 Camellia sinensis; Agrobacterium rhizogenes; hairy root culture; genetic transformation;
【摘要】 以两种野生型发根农杆菌菌株、三种共培养培养基和六种外植体为试材,建立了茶树发根高频诱导体系,最高发根诱导频率达30%以上。最佳发根诱导体系为:OD600为0.5~0.8的发根农杆菌菌液侵染已培养60~70 d苗龄无菌苗茎段10~50 min,在添加100 mmol/L乙酰丁香酮的YMB固体培养基上共培养2 d,在含500 mg/L头胞噻肟钠的MS培养基上诱导发根。发根在不含激素的LG0培养基上生长迅速,产生大量侧枝和根毛。PCR证实,发根农杆菌Ri质粒T-DNA的rolA、rolB和rolC基因已经插入到发根基因组DNA中。应用此发根诱导体系,以含携带Bt基因的双元载体质粒pCAMBIA2301的发根农杆菌15834,侵染茶树外植体诱导出发根,PCR和GUS组织化学染色证实外源基因已经插入到基因组DNA中并获得表达。
【英文摘要】 An efficient protocol for the establishment of transgenic high hariy root tea plant(Camellia sinensis) system induction infected by Agrobacterium rhizogenes is reported using two wild type strains of A.rhizogenes,three different co-cultivation media and six different explants.The highest induction frequency was obtained from stem segments of aseptic seedlings infected by A.rhizogenes and co-cultivated on YMB solid media with 100 mmol/L AS for 2 d.The hairy roots grew rapidly on LG0 medium without phytohormo...
【基金】 国家自然科学基金(30571192); 浙江省科技项目(2004C32079)
【更新日期】 2006-03-31
【分类号】 S571.1
【正文快照】 茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)是多年生木本植物,其自身的一些特性,如长生育周期、自交不亲和性、高度自交衰退、坐果率低等限制了其遗传改良的进行。利用遗传转化途径进行茶树育种越来越受到研究者的重视[1]。目前对茶树遗传转化研究较多,但成功的报道非常少,这是因为?

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