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外源基因pheA、aroG和tyrB在苯丙氨酸合成途径中的共表达  
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【英文篇名】 Co-expression of Heterologous Genes pheA,aroG and tyrB for Biosynthesis Pathway of L-phenylalanine
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【作者】 曾小冰; 范长胜; 江培翃; 陈永青; 黄伟达;
【英文作者】 ZENG Xiao\|Bing 1\ FAN Chang\|Sheng 1\ JIANG Pei\|Hong 2 CHEN Yong\|Qing 1\ HUANG Wei\|Da 2 ( 1Department of Microbiology and Microbial Biotechnology; 2Department of Biochemistry; Fudan University; Shanghai 200433);
【作者单位】 复旦大学微生物学和微生物工程系; 复旦大学生物化学系;
【文献出处】 生物工程学报 , CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY, 编辑部邮箱 2000年 06期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 aroGpheA-tyrB三基因串联表达; 苯丙氨酸生物合成; 氨基酸途径工程;
【英文关键词】 Co\|expression of genes aroG; pheA; and tyrB; phenylalanine biosynthesis; Pathway engineering for amino acid biosynthesis;
【摘要】 利用基因工程技术提高了短杆菌的苯丙氨酸合成途径中关键酶活性 ,大幅度地增加了生物合成苯丙氨酸的产量。首先采用聚合酶链反应 (PCR)从大肠杆菌的氟代苯丙氨酸抗性变异菌株基因组中扩增到与苯丙氨酸合成相关的aroG ,pheA和tyrB 3个基因。其中aroG编码 3 脱氧 2 阿拉伯庚酮糖 7 磷酸合成酶 (DS) ,pheA编码双功能酶蛋白 分枝酸变位酶 (CM)和预苯酸脱水酶 (PD) ,tyrB编码转氨酶 (AT)。设计不同的酶切位点 ,利用质粒pUC118的多克隆位点 ,将 3个基因按不同的顺序组合串联 ,然后插入穿梭质粒pCZ 10 ,导入短杆菌中表达。结果表明 3个大肠杆菌基因在短杆菌中能够表达。其中以aroG pheA tyrB顺序串联而构建的黄色短杆菌工程菌株1311 GAB中的DS酶活力提高 4 5倍 ,CM提高 4 2倍 ,PD提高 2 7倍 ,AT提高 3 2倍 ;它的苯丙氨酸合成量提高2 35倍。
【英文摘要】 Three genes related to the biosynthesis of phenylalanine, pheA,aroG, and tyrB , encode key enzymes: a bifunctional protein\|chorismate mutase (CM)/prephenate dehydratase (PD).3\|deoxy\|D\|arabino\|heptulonate\|7\|phosphate synthetase (DS), and aminotransferase (AT),respectively.In this work,these genes were amplified from Escherichia coli mutants resistant to fluro\|L\|phenylalanine (FP) by polymerase chain reaction (PCR).The genes were expressed either separately or linked tandem as operons in th...
【基金】 国家自然科学基金资助项目!( 3 9670 0 0 2 0 )
【分类号】 Q786
【正文快照】 苯丙氨酸是一种必需氨基酸 ,在医药、食品、保健方面的应用前景广阔。近十几年来 ,由于高甜度低热量的阿斯巴甜 (Ａｓｐａｒｔａｍｅ)的应用推广 ,作为它的生产原料的苯丙氨酸市场需求量猛增。苯丙氨酸属于芳香簇氨基酸 ,人体和动物不能合成 ,而微生物能够合成。它们以葡萄糖为

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