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谷胱甘肽合成酶在大肠杆菌中的高效表达及性质  
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【英文篇名】 Study on the Glutathione Synthetases Expression in Recombinant Escherichia coli and Properties
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【作者】 沈立新; 魏东芝; 赵哲峰; 张嗣良; 王二力;
【英文作者】 SHEN Li xin; WEI Dong zhi *; ZHAO Zhe feng; ZHANG Si liang; WANG Er li (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering; Research Institute of Biochemistry ECUST; Shanghai 200237; China);
【作者单位】 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;
【文献出处】 华东理工大学学报 , JOURNAL OF EAST CHINA UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY, 编辑部邮箱 2000年 04期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 谷胱甘肽合成酶; 大肠杆菌; 表达; 性质;
【英文关键词】 recombinant E.coli; Glutathione; synthetase; expression; properties;
【摘要】 在成功构建了谷脱甘肽 ( GSH)合成酶基因表达质粒 ( p Trc- gsh)的基础上 ,对不同大肠杆菌宿主菌进行了比较 ,筛选出高效、稳定表达 GSH合成酶的工程菌并进行了最佳酶表达条件的研究。结果表明 :重组工程菌 E.coli BL2 1 ( p Trc- gsh)表达量最高 ,质粒稳定性好 ;以 5%接种量于37°C、p H7.2培养至 OD550 =0 .5左右 ,加入诱导剂 IPTG( 0 .1 mmol/ L) ,同时切换培养条件为 34°C、p H6 .7的两步培养法 ,培养 3h后 ,GSH酶表达量达菌体总蛋白的 2 5%,干细胞酶活为1 1 4.9μg/ ( mg·min) ;其最适 p H为 6 .7,最适温度为 37°C。
【英文摘要】 The plasmid pTrc harboring Glutathione synthetases gene (gsh I and gsh II) was transformed into different E. coli host strains in order to screen the best one. E. coli BL21 (pTrc gsh) can express the related enzymes with high level and stable activity. Two step culture was developed for the enzymes production. The engineering strain was incubated at 37°C and pH7.2 up to about OD 550 =0.5 during the first step. The condition was then switched to 34°C and pH6.7 after induction with IPTG(0...
【分类号】 Q78
【正文快照】 谷胱甘肽 ( GSH)是由 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 ( GSH- I)和谷胱甘肽合成酶 ( GSH- II)连续催化合成的一种低相对分子质量非蛋白巯基化合物 ,具有独特的抗氧化、抗衰老特性 ,近年来作为食品添加剂、保健品、药物等需求量逐渐增加。而我国至今仍未实现 GSH工业化生产。传统的 GS

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