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苯丙氨酸合成的关键酶基因aroG与pheA串联表达  
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【英文篇名】 EXPRESSION OF GENES aroG AND pheA IN PHENYLALANINE BIOSYNTHESIS
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【作者】 范长胜; 曾小冰; 柴运嵘; 江培翃; 黄伟达;
【英文作者】 Fan Changsheng Zeng Xiaobing Chai Yunrong ( Departmentof Microbiology Fudan University Shanghai China 200433)Jiang Peihong Huang Weida ( Departmentof Biochemistry Fudan University Shanghai China 200433);
【作者单位】 复旦大学微生物学系; 复旦大学生物化学系;
【文献出处】 微生物学报 , ACTA MICROBIOLOGICA SINICA, 编辑部邮箱 1999年 05期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 苯丙氨酸生物合成; aroG基因; pheA基因; 基因串联表达;
【英文关键词】 Phenylalanine biosynthesis; aroGgene; pheAgene; Genesco expression;
【摘要】 aroG 和pheA 是与苯丙氨酸合成有关的两个重要基因。在大肠杆菌( Escherichiacoli) 中,aroG 基因编码脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸合酶(DS) ,该酶催化由糖代谢中心途径分流出来的磷酸烯醇丙酮酸(PEP) 和赤鲜糖4磷酸(E4P) 缩合形成脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸(DAHP) 的反应;pheA 基因编码一个双功能酶蛋白,它同时催化两步关键反应,即具有分枝酸变位酶(CM) 和预苯酸脱水(PD) 的两种功能。采用PCR 技术分别从两个不同品系的大肠杆菌染色体DNA 中扩增到aroG 和pheA。当这两个基因串联在一个质粒上导入大肠杆菌P2392 中进行表达时,它们编码的酶DS、CM 和PD 活性分别提高4-3 、4-4 和2-2 倍;导入短杆菌( Brevibacterium)2731 中表达时,相应的酶活性分别提高12-3 、2-3 和5-6 倍。两基因的串联表达能大幅度地提高工程菌株的苯丙氨酸发酵产量。
【英文摘要】 aroGand pheAgenes,encoding 3 Deoxy D arabinoheptulonate 7 phosphatesyn thase(DS) and Chorismate mutase (CM) prephenate dehydratase(PD) in the pathway of phenylalnine biosynthesisrespectively,were amplified by polymerase chain reaction(PCR) .The genes were assembled on the multicopy vectors and expressed in both Escherichia coli and Brevibacterium .The productsoftwogene weredetected by SDS PAGE.Theactivities ofrelevantenzymes were measuredinthecrudeextractofthe hoststrain. When aroG pheA genes...
【基金】 国家自然科学基金;云南省应用基础研究基金
【分类号】 Q786
【正文快照】 苯丙氨酸是一种很有价值的必需氨基酸,人及动物不能合成,而微生物能够合成。该氨基酸在医药和甜味剂制造方面市场需求量大,目前市场所需的产品除少量化学合成外大都是通过微生物发酵生产的。微生物合成苯丙氨酸以糖类为碳源,首先由糖代谢中心途径分流出来的磷酸烯醇丙酮酸?

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