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RT-PCR法测定脂肪组织解偶联蛋白mRNA表达水平的探讨

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【英文篇名】	QUANTIFICATION OF UNCOUPLING PROTEIN mRNA EXPRESSION LEVEL IN ADIPOSE TISSUE BY RTPCR ASSAY
【下载频次】	★★★★☆
【作者】	刘永明;
【英文作者】	Liu Yongming(Department of Biochemistry; Guilin Medical; College; Guilin 541001)\=Hannes Oberkofler; Wolfgang Patsch(Department of Laboratory; Medicine; Landerkrankenanstalten Salzburg; Austria)\=;
【作者单位】	广西桂林医学院生物化学教研室;
【文献出处】	广西医科大学学报 , JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY, 编辑部邮箱 1999年 03期期刊荣誉：ASPT来源刊中国期刊方阵 CJFD收录刊
【中文关键词】	解偶联蛋白; mRNA; RT－PCR;
【英文关键词】	uncoupling protein; mRNA; RTPCR;
【摘要】	目的：建立解偶联蛋白（ＵＣＰ）ｍＲＮＡ表达水平的竞争性ＲＴ－ＰＣＲ测定法；并应用该方法测定ＵＣＰｍＲＮＡ在成人腹膜内与腹膜外脂肪组织的表达水平。方法：应用剪接重叠延伸ＰＣＲ（ＳＯＥ－ＰＣＲ）合成中央缺失型ＵＣＰ竞争者ＲＮＡ。ＵＣＰｍＲ－ＮＡ与作为内设标准的ＵＣＰ竞争者ＲＮＡ用相同的引物在同一反应体系中进行逆转录反应和ＰＣＲ扩增。通过比较ＵＣＰｍＲ－ＮＡ产物和ＵＣＰ竞争者ＲＮＡ产物的放射性信号强度求取ＵＣＰｍＲＮＡ表达水平。结果：腹膜内与腹膜外脂肪组织样品中均检测到ＵＣＰｍＲＮＡ；ＵＣＰｍＲＮＡ表达水平腹膜内脂肪组织为（６．８５３±４．２０７）ａｍｏｌ／ｆｍｏｌβ－ａｃｔｉｎ，腹膜外脂肪组织为（０．５２１±０．４９７）ａｍｏｌ／ｆｍｏｌβ－ａｃｔｉｎ（ｘ±ｓ）（Ｐ＜０．００１）。结论：本竞争性ＲＴ－ＰＣＲ方法测定脂肪组织ＵＣＰｍＲＮＡ表达水平灵敏、准确；ＵＣＰｍＲＮＡ在成人腹膜内与腹膜外脂肪组织均有表达，并且表达水平腹膜内脂肪组织高于腹膜外脂肪组织。
【英文摘要】	Objective: To establish a competitive reverse transcriptionPCR(cRTPCR) assay for quantification of uncoupling protein (UCP) mRNA and determine UCP mRNA expression levels in intra-and extraperitoneal adipose tissues of adult humans Methods: Splice overlap extensionPCR (SOEPCR) was used for synthesis of a competitor fragment that contained a deletion at its centerUCP mRNA and UCP competitor RNA which was used as an internal standard were reverse transcrib...
【基金】	桂林医学院人才工程基金,奥地利萨尔茨堡医学研究基金
【分类号】	Q753
【正文快照】	产热调节是机体能量消耗与体质量平衡的重要环节。在啮齿类动物，机体产热调节的主要部位是褐色脂肪组织（Ｂｒｏｗｎａｄｉｐｏｓｅｔｉｓｓｕｅ，ＢＡＴ），其中的解偶联蛋白（Ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＵＣＰ）在产热调节中起关键作用。ＵＣＰ是一种在ＢＡＴ特?

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