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Class I新城疫病毒反向遗传操作系统建立  
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【会议录名称】 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集 , 2012 年
【作者】 刘华雷; 陈云霞; 管峰; 郑东霞; 赵云玲; 王志亮;
【英文论文作者】 LIU Hua-lei; CHEN Yun-xia; GUAN Feng; ZHENG Dong-xia; ZHAO Yun-ling; WANG Zhi-liang(China Animal Health and Epidemiology Center; Qingdao 266032);
【作者单位】 中国动物卫生与流行病学中心;
【会议名称】 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会
【会议地点】 中国广东广州
【主办单位】 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
【学会名称】 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
【主编】 丁铲、童光志、马志永
【关键词】 I类新城疫病毒; 病毒拯救;
【英文论文关键词】 Newcastle disease virus; Class I; Virus rescue;
【论文摘要】 根据I类新城疫病毒NDV08-004基因组序列(GenBank登录号FJ794269),设计7对引物,采用RT-PCR将NDV08-004基因组扩增的7个片段片段(A~G)分别克隆进pGEM-Teasy载体,然后采用单一的酶切位点将7个片段依次亚克隆到LT-pOLTV5转录载体中,构建了含NDV08-004全基因组cDNA的转录载体NDV08-004-pO。采用构建的三个辅助质粒(pCI-NP、pCI-P和pCI-L)与基因组NDV08-004-pO按照一定比例共转染BSRT7/5细胞,通过将转染上清接种SPF鸡胚进行继续复制,结果成功拯救出了具有血凝性的NDV08-004,初代血凝价为4log2,传代后血凝价达到7log2以上。I类新城疫病毒NDV08-004分离株反向遗传操作体系的建立为开展I类新城疫病毒的致病机理奠定了基础。
【英文论文摘要】 Based on the genomic sequence of NDV08-004(GenBank accession number FJ794269),seven pairs of primers were designed to amplify the genomic fragments by RT-PCR and cloned into pGEM-Teasy vector.The fragments(named A to G)were sub-cloned into transcription vector pOLTV5 according to the universal RE site and the plasmid named NDV08-004-pO which contained the full length cDNA of NDV08-004 strain was constructed.Three helper plasmids(pCI-NP,pCI-P and pCI-L)together with NDV08-004-pO were co-transfected into BSR ...
【基金】 国家自然科学基金(编号:30901079)资助项目
【更新日期】 2012-06-01

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