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红曲霉谷氨酸脱羧酶的性质研究  
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【会议录名称】 2007年学术年会论文集 , 2007 年
【作者】 徐冬云; 江仲文;
【作者单位】 轻工业杭州机电设计研究院;
【会议名称】 2007年学术年会
【会议地点】 中国湖北宜昌
【主办单位】 中国机械工程学会包装与食品工程分会、中国农业机械学会农副产品加工机械分会
【学会名称】 中国机械工程学会包装与食品工程分会
【关键词】 红曲霉; 谷氨酸脱羧酶(GAD); 比色法;
【论文摘要】 确定了快速测定红曲霉谷氨酸脱羧酶(GAD)酶活的测定方法—比色法．得到 GAD 酶活的适宜反应底物体系为：0．1mol/L 的柠檬酸缓冲液,pH5．0,内含50mmol/L 底物 L-谷氨酸钠(L-MSG)、0．1mmol/L5’-磷酸毗哆醛(PLP)；测定方法为：200μL 底物溶液和100μL 酶液于37℃水浴中反应一定时间(根据活力大小反应0．5～20h 不等),在冰浴中加入200μL、0．2mol/L、pH9．0的硼酸盐缦冲液终止反应,再加入1．0mL 新鲜配制的6%苯酚和 400μL 次氯酸钠溶液并充分振荡,置于沸水浴中反应10min。迅速在冰浴中冷却5min．于630nm 下测定吸光值．通过细胞破碎、(NH4)_2SO_4盐析和 Sepharose CL-6B 凝胶柱层析,对红曲霉 GAD 进行了有效的分离和纯化,纯化后酶活提高了6．56倍。采用 SDS-PAGE 初步断定出红曲霉 GAD 的蛋白分子量在67KD 左右．红曲霉 GAD 酶液最适反应温度为 30℃．在 pH 4．4～4．8范围内酶活较高．红曲霉培养到第6天时 GAD 活性达到最高。
【更新日期】 2007-11-23

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