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三聚氰胺单克隆抗体制备及间接竞争ELISA方法的初步建立  
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【英文题名】 The Study on the Preparation of McAb to Anti-Melemine and Establishment of Ic-ELISA for Detetion of Melamine
【作者】 盛明巍;
【导师】 赵玉军;
【学位授予单位】 沈阳农业大学;
【学科专业名称】 预防兽医学
【学位年度】 2011
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 沈阳农业大学
【网络出版投稿时间】 2012-03-09
【关键词】 三聚氰胺; 单克隆抗体; 重氮法; 间接竞争酶联免疫吸附法;
【英文关键词】 melamine; monoclonal antibody; Diazo synthesis method.; ic-ELISA;
【中文摘要】 三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料,但是却被不法商贩添加到食品、饲料、乳制品中,作为“假蛋白”来提高产品或制品的蛋白含量。目前研究表明,三聚氰胺长期摄入则会造成生殖、泌尿系统的损伤、膀胱和肾脏结石,甚至可进一步诱发膀胱癌。因此应建立一种快速、简便、准确、灵敏的检测技术,以避免三聚氰胺通过食物链而危害人类的健康。 首先,以BSA和OVA为载体,采用重氮法合成免疫抗原三聚氰胺-BSA和检测抗原三聚氰胺-OVA,使用聚丙烯凝胶电泳对合成抗原进行分析,用BCA法测定合成抗原含量分别为三聚氰胺-BSA平均蛋白浓度1917.10μg.mL-1和三聚氰胺-OVA平均蛋白浓度3546.68μg.mL-1,使用紫外分光光度计测定三聚氰胺和载体蛋白的偶联比率分别为三聚氰胺-BSA17.8和三聚氰胺-OVA26。 其次,利用合成的三聚氰胺-BSA以腹腔注射途径免疫6周龄健壮活泼雌性Balb/c小鼠,以5μg.mL-1三聚氰胺-OVA包被酶标板,利用间接ELISA方法检测小鼠血清抗体效价。经五次免疫,每次间隔21d,选择血清效价最高的小鼠进行细胞融合(≥1:16000),将免疫脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG...
【英文摘要】 Melamine are important azacyclo- organizing chemical materials. Melamine is added to Food, animal feeds and milk by unlawful venders. It is as pseudo-protein to increase the protein level. Recent research show that melamine is little toxic lonely, but animals maybe cause the damages of reproductive system and urinary system, bladder calculus and kidney stones, even bladder carcinoma with intaking melamine for long-term. So it is requisite to establish a fast, easy and accurate detection method that can avoi...
【更新日期】 2012-03-31

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