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铅全抗原的制备及铅抗体酶联免疫检测体系的建立  
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【英文题名】 Preparation of Lead Artificial Antigen and Establishment of Immune Detection System of Lead Abzyme
【作者】 严杰琳;
【导师】 刘成梅; 罗舜菁;
【学位授予单位】 南昌大学;
【学科专业名称】 食品科学
【学位年度】 2011
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 南昌大学
【网络出版投稿时间】 2011-12-12
【关键词】 单克隆抗体; 重金属; ; 人工抗原;
【英文关键词】 monoclonal antibody; heavy metal; led; artificial antigens;
【中文摘要】 铅是一种具有高蓄积性、多亲和性的生理性和神经性毒物,各国对食品与环境中的铅残留量均有严格的限制。铅抗原与铅抗体的制备是建立铅酶联免疫快速检测试剂盒的基础和关键,本研究运用高度特异性的抗原抗体反应,及免疫竞争结合原理,采用双功能螯合剂将铅与牛血清白蛋白(BSA)桥接合成全抗原免疫Balb/c小鼠,对铅抗体的检测方法进行优化,经细胞融合等步骤制备抗铅单克隆抗体,主要内容如下: 1)铅全抗原的制备 采用双功能螯合剂[(R)-2-氨基-3-(4-氨基苯基)丙基]-(S-S)环己烷-1,2二乙三胺五乙酸(P-NH2-Bn-Chx-A-Dtpa)制备重金属铅全抗原,分别用戊二醛法,重氮化法等方法,将螯合剂与牛血清蛋白(BSA)连接,再将合成的蛋白螯合剂复合物与铅离子螯合得到全抗原BSA-P-NH2-Bn-Chx-A-Dtpa-Pb,其中戊二醛法与重氮化法得到的人工抗原,蛋白与铅的偶联比分别为1:15.64与1:42.95(1:42.95抗原为絮状沉淀物免疫效果不佳)。另外,本研究将戊二醛法予以优化,将戊二醛法制备的蛋白螯合剂复合物与铅离子进行两步合得到抗原BSA-P-NH2-Bn-Chx-A-Dtpa-P...
【英文摘要】 Lead is a Physiological and nerve toxicant with high accumulating property and multiple affinities, and every country has close restraints on the residual quantity of lead in food and environment. The preparation of lead antigen and lead antibody is the basis and key point to build up quick testing kit for lead-enzyme immunity. This research considers adopting antigen and antibody reaction with high-specificity, along with the immune competition binding principle, to bridge and synthesize lead and BSA (Bovi...
【更新日期】 2012-01-17

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