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产脂肪酶细菌的筛选以及酶基因的克隆表达  
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【英文题名】 Screen of a Lipase-Producing Strains, Gene Cloning and Expression of Lipase
【作者】 赵爽;
【导师】 潘康成;
【学位授予单位】 四川农业大学;
【学科专业名称】 生物化学与分子生物学
【学位年度】 2011
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 四川农业大学
【网络出版投稿时间】 2011-11-25
【关键词】 枯草芽孢杆菌; 脂肪酶; 筛选; 微生态; 基因; 克隆表达;
【英文关键词】 Bacillus subtilis; Lipase; Screen; Gene of lipase; Cloning and Expressing;
【中文摘要】 本文主要从脂肪酶产生菌的筛选、酶活性的研究、产酶菌株对小鼠的部分微生态学效应及脂肪酶基因的克隆表达四个方面进行了研究。 1.从富含油污泥土中经过富集、平板初筛选及摇瓶复筛,筛选得到了具有脂肪酶活的8株菌,其中PZ04酶活最高。通过传统的鉴定手段和现代分子生物学技术相结合的方法,确定了PZ04属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。对PZ04所产脂肪酶酶学性质研究表明:PZ04脂肪酶粗酶液最适温度为37℃,最适pH为8.7,在pH8.0-10.0温度20-45℃的范围内,酶活性保持在65%以上。10mM/L的Zn2+、Mg2+、Ca2+能够提高脂肪酶的活力而Cu2+和Fe2+有抑制性,使脂肪酶活力下降。 2.选用三周龄小鼠96只,随机分为3组,分别饲喂基础日粮中用添加0.1%的PZ04制成浓度为5×108CFU/g和1×109CFU/g的芽孢杆菌制剂,和饲喂基础日粮的空白对照组。实验结果表明芽孢杆菌制剂均能改善小鼠生长性能而1×109CFU/g浓度芽孢杆菌制剂在4-5周龄时显著提高小鼠周增重量;在3—4周龄阶段使用芽孢杆菌制剂组的免疫器官指数与其空白组相比差异显著(P<0.05)...
【英文摘要】 In this thesis, a lipase-producing strains was screened and the enzyme activity of lipase was researched. The strain of lipase-producing was made as microbial additives suspension and the mice were fed by it. The effect of growth, immune function, and intestinal microbial communities of mice were detected.Then the gene of lipase was cloned and expressed. The results were showed as follow: 1.8 lipase-producing strains was screened from soil which stained by oil. Through enrichment, plate isolation, flask...
【更新日期】 2012-02-16

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导师:潘康成    导师单位:四川农业大学    学位授予单位:四川农业大学
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