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酿酒酵母ALD4基因敲除与GPD1基因沉默研究  
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【英文题名】 Study on ALD4 Gene Disruption and GPD1 Silencing in Saccharomyces Cerevisiae Industrial Strain Y01
【作者】 曹罗元;
【导师】 陈由强;
【学位授予单位】 福建师范大学;
【学科专业名称】 微生物学
【学位年度】 2010
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 福建师范大学
【网络出版投稿时间】 2011-05-05
【关键词】 酿酒酵母; 乙醛脱氢酶; 甘油脱氢酶; 反义技术; 基因敲除; 同源重组;
【英文关键词】 Saccharomyces cerevisiae; ALDH; GPDH; Antisence technology; Gene disruption; Homologous recombination;
【中文摘要】 乙酸与甘油是酿酒酵母乙醇发酵过程主要的副产物。本研究通过敲除酿酒酵母Y01乙醛脱氢酶ALD4基因,获得了ALD4基因缺失的突变体DY01；通过构建反义表达载体抑制酿酒酵母甘油脱氢酶关键基因GPD1的转录,以促进乙醇发酵。结果如下： 1.采用以PCR为基础的loxP-KanMX-loxP序列组件和Cre/loxP删除系统删除了酿酒酵母工程菌Y01乙醛脱氢酶ALD4基因,获得突变株DY01；酿酒酵母ALD4缺失菌株DY01发酵液乙醇比出发菌株酿酒酵母Y01提高了6.88%。 2.通过构建酿酒酵母实验菌株INVScl甘油脱氢酶GPD1基因5'UTR反义表达载体pYES2.0-GPD1,实验组比对照组的3-磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的比活力最大下降了24.03%；甘油产量含量下降幅度最大达到了25.43%,而且甘油含量的下降滞后于3.磷酸甘油脱氢酶活性的下降。 3.通过构建酿酒酵母突变株DY01甘油脱氢酶GPD1基因5'UTR反义表达载体pYES2.0-GPD1/KanMX,获得酿酒酵母DRY01菌株；酿酒酵母DRY01菌株的甘油脱氢酶(GPDH)的比活力比出发菌株DY01下降了20.04%；...
【英文摘要】 Acetic acid and glycerol are the major by-product in Saccharomyces cerevisiae ethanol fermentation.In this paper,S.cerevisiae Y01 aldehyde dehydrogenase ALD4 gene was disrupted.ALD4 gene deletion mutants DY01 was obtained.The production of S.cerevisiae ethanol was increased by GPDl silenced via antisense expression vector. The results were described as follows: 1, PCR-based loxP-KanMX-loxP and Cre/loxP system apply to delete the industrial strain S.cerevisiae Y01 aldehyde dehydrogenase ALD4 gene.The pro...
【更新日期】 2011-07-15

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