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人Canstatin基因转染对肝癌HepG2细胞血管生成拟态的影响及机制研究  
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【英文题名】 Effects of Canstatin Gene Transfection on Vasculogenic Mimicry in Hepatocellular Carcinoma Cell Line HepG2 in Vitro and in the Formation of a Very Possible Mechanism
【作者】 张志会;
【导师】 王雪雯;
【学位授予单位】 石河子大学;
【学科专业名称】 病理学与病理生理学
【学位年度】 2010
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 石河子大学
【网络出版投稿时间】 2011-09-27
【关键词】 HepG2; Canstatin; 基因转染; 肝细胞癌; 血管生成拟态;
【英文关键词】 HepG2; Canstatin; gene transfer; hepatocellular carcinoma; vasculogenic mimicry;
【中文摘要】 目的:通过肝癌HepG2细胞的体外三维培养,观察其形成血管生成拟态的能力,探讨重组人Canstatin基因表达产物对肝癌HepG2细胞血管生成拟态形成能力的影响及作用机制。 方法：将pcDNA3.1-Canstatin-3Flag分泌型重组质粒,用Cacl2法转染到大肠杆菌DH5a,经AMP筛选,挑取阳性质粒酶切鉴定、测序,用脂质载体介导法将pcDNA3.1-Canstatin3Flag转染人肝癌HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1转染肝癌HepG2细胞为对照,经G418培养基筛选获得阳性克隆,Western-blot鉴定转染细胞中Canstatin蛋白的表达。建立HepG2细胞基底膜基质凝胶体外三维细胞培养模型,以HepG2细胞在六孔板中常规培养为对照,观察HepG2细胞血管生成拟态形成能力。各组细胞(HepG2细胞组、空载体转染HepG2细胞组、重组载体转染HepG2细胞组)分别在96孔板中常规培养48h,MTT法检测各组增殖抑制率。各组细胞在基底膜基质凝胶进行体外三维培养,观察比较各组细胞的血管生成拟态形成能力,同时用免疫细胞化学法检测各组细胞MMp-2、VE-cadherin蛋白表达情况。...
【英文摘要】 Object:Hepatoma cell line HepG2 in vitro culture, to observe the formation of vascular mimicry, and to observe and explore the gene expression product of recombinant human Canstatin hepatoma HepG2 cells on vasculogenic mimicry in the formation of a very possible mechanism. Methods:pcDNA3.1-Canstatin-3Flag secreted recombinant plasmid transfection with Cacl2 into E.coli DH5a, selected by AMP, picked plasmid restriction endonuclease digestion, sequencing, lipid vector-mediated method with pcDNA3.1- Cansta...
【更新日期】 2011-11-04

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