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微囊藻毒素-LR酶联免疫法的开发研究  
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【英文题名】 The Study on Microcystin-LR's Development of Enzyme-linked Immunosorbent Assay
【作者】 张爱;
【导师】 杨良;
【学位授予单位】 云南大学;
【学科专业名称】 生态学
【学位年度】 2010
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 云南大学
【网络出版投稿时间】 2010-12-09
【关键词】 微囊藻毒素-LR; 提取; 纯化; 完全抗原; 杂交瘤技术; 酶联免疫吸附(ELISA);
【英文关键词】 Microcycstin-LR; Extract; Purification; Complete antigen; Hybridoma technology; Enzyme-linked immunosorbentassay(ELISA);
【中文摘要】 酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)建立于1971年,并用于医学研究。微囊藻毒素的ELISA分析国外应用得早一些,国内也有应用,但不如国外成熟。本文以微囊藻毒素-LR的酶联免疫分析作为探讨对象,内容包括微囊藻的毒素-LR的提取与纯化、微囊藻毒素-LR的完全抗原化、以及微囊藻毒素-LR单克隆抗体细胞株的筛选培养。 (1)通过对从滇池捞取的新鲜藻样过筛选取、冷冻干燥制得蓝藻藻粉;用醋酸溶液破坏蓝藻细胞壁,使藻毒素溢出细胞;通过C18柱子的浓缩富集作用,用80%的甲醇溶液洗脱并收集藻毒素的提取液;对藻毒素提取液进行液相色谱分离分析,确定MC-LR保留时间为30min～31min,收集MC-LR分离液,浓缩、过C18柱纯化MC-LR,得到MC-LR粗提取液,在荧光硅胶薄层板的进一步精密分离下,得到MC-LR精制样品;通过液相色谱-质谱仪(LC-MS)鉴定,采用外标法计算,得到纯度为98.79%的MC-LR精制样品。本试验一共提取MC-LR精制样品6.4mg。 (2)MC-LR的分子量为995.2D,是典型的半抗原。在免...
【英文摘要】 Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was established in 1972 applied to Medical Research. ELISA analysis of microcystins was earlier applied abroad. It’s also applied at home, but it wasn’t as matuar as abroad. In this paper, We study mainly in ELISA analysis of microcystins. It include extracting and purification of MC-LR, making incomplete antigen to complete antigen of MC-LR, screening and cuiluring monoclonal antibody cell line of MC-LR. (1)We got enough cyanobacteria from DianchiLake...
【更新日期】 2011-03-01

【相同导师文献】

导师：杨良    导师单位：云南大学    学位授予单位：云南大学
[1] 孙长青.滇池浮游动物的群落结构和种群数量变化的研究[D]. 云南大学,2010
[2] 张爱.微囊藻毒素-LR酶联免疫法的开发研究[D]. 云南大学,2010
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