嗜铁钩端螺旋菌Leptospirillum ferriphilum UBK03抗镍操纵子表达调控机理研究 在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】
Study on the Mechanism of Regulation for the Nickel Resistance Determinant Expression in Leptospirillum Ferriphilum UBK03
【作者】
朱涛 ;
【导师】
伍宁丰 ;
【学位授予单位】
中国农业科学院 ;
【学科专业名称】
微生物学
【学位年度】
2011
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
中国农业科学院
【网络出版投稿时间】
2011-09-08
【关键词】
嗜铁钩端螺旋菌UBK03 ;
NcrB ;
基因表达调控 ;
转录调节蛋白 ;
【英文关键词】
Leptospirillum ferriphilum UBK03 ;
NcrB ;
Regulation of gene expression ;
Transcriptional regulator ;
【中文摘要】
本实验室从嗜铁钩端螺旋菌UBK03中克隆到一个与镍抗性相关的操纵子ncrABCY,该操纵子含4个结构基因ncrA,ncrB,ncrC及ncrY。NcrA为该抗性系统的核心组件,与辅助蛋白NcrC组装成跨膜通道,NcrY对抗镍系统起负作用,NcrB作为阻遏蛋白能够调节ncrA基因的表达。本论文研究是以此操纵子为对象,开展了其表达调控机理的研究。
将ncrABCY转入大肠杆菌JM109得到克隆子NR21。通过比较未经Ni2+诱导及经过诱导的NR21菌株在含Ni2+ LB培养基中的生长情况,发现未经诱导的NR21菌株生长比经过诱导的NR21菌株要滞后2小时,说明ncrABCY受Ni2+诱导表达。RT-PCR实验对基因转录分析,发现Ni2+能够增强ncrA,ncrB,ncrC的转录水平,荧光定量PCR结果显示在含Ni2+ LB培养基中生长的NR21菌株ncrA的转录量要比在普通LB培养基中高10倍。
利用S1 mapping实验确定了ncrA基因的转录起始位点。对ncrA启动子pncrA序列分析,在转录起始位点上发现了一段富含GC的反向重复序列p1p17,并且通过凝胶阻滞实验和DNase I足迹实...
【英文摘要】
A nickel resistance determinant ncrABCY was identified in Leptospirillum ferriphilum UBK03. There were four genes in this operon, ncrA, ncrB, ncrC and ncrY. NcrA, which was the base of the nickel resistance system, can constitute the nickel efflux pump together with the accessory protein NcrC. NcrY had a negative effect on nickel resistance. Moreover, NcrB can regulate the expression of ncrA as a transcriptional regulator. In this study, we aimed at the operon to elucidate its mechanism of expression and re...
【更新日期】
2011-10-11
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