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CP4-EPSPS溯源用标准蛋白在大肠杆菌中的表达与制备  
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【英文题名】 Expression in E.coli and Preparation of the Standard Tracing Protein CP4-EPSPS
【作者】 刘树鹏;
【导师】 刘德虎;
【学位授予单位】 中国农业科学院;
【学科专业名称】 生物化学与分子生物学
【学位年度】 2011
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 中国农业科学院
【网络出版投稿时间】 2011-09-08
【关键词】 CP4-EPSPS; 大肠杆菌表达; 蛋白纯化; Elisa;
【英文关键词】 CP4-EPSPS; Expression in E.coli; Protein purification; Elisa;
【中文摘要】 5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合酶EPSPS(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,EPSPS:EC 2.5.1.19)是莽草酸途径中的关键酶,能够催化PEP(磷酸烯醇式丙酮酸)与SP3(莽草酸-3-磷酸)生成EPSP(5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸),为芳香族氨基酸的合成提供前体物质,该酶广泛地存在于微生物及高等植物体内。由于EPSPS是除草剂草甘膦的靶标酶,所以筛选高抗草甘膦EPSPS新基因的研究工作被广泛展开,来自根癌农杆菌(Agrobacterium sp.)CP4菌株的EPSPS对高浓度的草甘膦表现出非常高的抗性,此后该基因被广泛地应用于多种作物的转基因研究中,截止2010年,包括大豆、玉米、油菜、棉花、甜菜和苜蓿等,播种面积近8930万公顷的转基因作物中都含有该抗除草剂基因。面对大量含有CP4-EPSPS转基因的作物或食品进口我国,建立科学的检测方法尤为迫切。虽然现在市场上有多种用于转基因蛋白质测定的试剂盒,但不同厂商采用不同的工艺表达以及方法确定参考物质的量值,无法溯源到上一级的计量标准,造成测定结果不准确和缺乏可比性,由此给生物安全监管带来隐...
【英文摘要】 EPSPS (5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase, EPSPS: EC 2.5.1.19) is a key enzyme in shikimate pathway that catalyzes the PEP (phosphoenolpyruvate type pyruvate) and SP3 (shikimic acid -3-phosphate) generated EPSP (5-enolacetone shikimic acid-3-phosphoric acid), provide the precursors for aromatic amino acids generating. EPSPS exists widely in microbes and higher plants. EPSPS is also the target enzyme of glyphosate herbicide, since this reason the research related to the EPSPS has been widely carrie...
【更新日期】 2011-10-11

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