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山葡萄转色期果皮cDNA文库的构建与分析  
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【英文题名】 Construction and Analysis of cDNA Library from Vitis Amurensis Grapevine Skins at Veraison
【作者】 李波;
【导师】 王军; 杨成君;
【学位授予单位】 东北林业大学;
【学科专业名称】 森林植物资源学
【学位年度】 2011
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 东北林业大学
【网络出版投稿时间】 2011-08-25
【关键词】 山葡萄; cDNA文库; 表达序列标签; 生物信息学; 基因克隆;
【英文关键词】 Vitis amurensis; cDNA library; Expressed sequence tag; Bioinformatics; Gene Cloning;
【中文摘要】 葡萄是世界范围内重要的果树树种,也是栽培品种最多的物种之一。葡萄鲜果除鲜食外,又可作为酿酒、制干、制汁等原料而具有极高的经济价值。山葡萄是我国重要的野生果树资源,具有极强的抗寒性,是我国东北地区酿造葡萄酒的主要原料。转色期作为非跃变型果实特有的一个生长阶段,是浆果在大小、硬度、色泽以及内部生理生化发生剧烈变化的时期。为了获得大量山葡萄功能基因信息,并以此为基础筛选感兴趣的目的基因,本文构建了山葡萄转色期果皮的cDNA文库,并进行了较高通量的EST测序和生物信息学分析。主要的研究成果如下: 1、采用改良的CTAB法提取山葡萄转色期(50%着色)果皮的总RNA,通过LD-PCR反转录合成双链cDNA,以pDNR-LIB为载体,采用电穿孔法将重组质粒转化到DH5α中,构建了山葡萄转色期果皮cDNA文库。文库插入片段大小为0.5 kb~2 kb之间,平均约为0.8 kb。原始文库滴度为1.12×106 pfu·mL-1,扩增后的文库滴度为2.82×109pfu·mL-1,重组率接近100%,表明所构建的cDNA文库质量高,完整性好。 2、从山葡萄转色期果皮cDNA文库中随机挑取1009个单克隆进行...
【英文摘要】 Grapevine is one of the most essential fruit varieties, as well as one of the most cultivated species all over the world. Its fruit can be taken fresh and used into wine. Besides that, as the raw stuffs for raisin and grape juice, it has great economic value. Vitis amurensis is one of the most important wild fruit resources, with very strong cold resistance, which is the main raw materials to make wine in north-eastern district of China. Veraison is the peculiar stage of non-climacteric fruits, in which gre...
【更新日期】 2011-11-02

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