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抗体Fc片段纤维素膜的制备及其应用  
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【英文题名】 Preparation and Application of Cellulose Membrane Immobilized Fc Fragment of Antibody
【作者】 张郑华;
【导师】 贾凌云;
【学位授予单位】 大连理工大学;
【学科专业名称】 生物医学工程
【学位年度】 2011
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 大连理工大学
【网络出版投稿时间】 2011-07-30
【关键词】 Fc片段; 亲和膜; rProteinA; 纯化; 功能基;
【英文关键词】 Fc fragment; affinity membrane; rProtein A; purification; functional group;
【中文摘要】 蛋白A(Protien A)是某些金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白,根据其可以和人及一些哺乳动物血清中免疫球蛋白的Fc片段特异性结合的特点,已经被应用于抗体的纯化和自身免疫性疾病的治疗。获得大量高纯度、高生物活性的Protein A或类Protein A功能的小分子是其中的关键问题之一,为了达到这一目的,本论文制备了偶联有Fc片段的纤维素膜,并研究了利用该亲和膜进行重组Protein A纯化和筛选分子簇结构仿生小分子亲和配基的可行性。主要结果如下: 1.优化了通过木瓜酶酶解IgG获得Fc片段的条件,最优条件为37℃,pH 7.5,酶解2 h,酶与底物比为480 U/mg。并利用Protein A亲和层析柱从酶解混合物分离纯化得到Fc片段。 2.研究了偶联Fc片段的纤维素膜的制备过程。确定较优的NaIO4氧化条件为pH 5的0.1 mol/L柠檬酸缓冲液,NaIO4浓度为0.2 mol/L,氧化时间控制15 min。依次偶联间隔臂己二胺和戊二醛,最后将Fc片段固定到活化后的纤维素膜上,该亲和膜Fc片段的固定量为11.75 mg/g。 3.偶联Fc片段的纤维素膜对Protein A的静态饱和...
【英文摘要】 Protein A is a cell wall protein of Staphylococcus aureus. It has been applied in purification of antibodies and treatment of autoimmune disease since protein A can interact with Fc of antibodies. It is one of importants to get plenty of highly purified protein A with high bioactivity or small molecules with function of protein A. In order to get the idea, cellulose membrane immobilized Fc fragment was prepared and applied in purification of protein A and selection of biomimetic small affinity ligands with ...
【更新日期】 2011-08-22

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导师:贾凌云    导师单位:大连理工大学    学位授予单位:大连理工大学
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