【英文题名】
Functional Analysis of StPKS Gene Regulating Melanin Synthesis and Pathogenicity of Setosphaeria Turcica
【作者】
张鑫 ;
【导师】
董金皋 ;
【学位授予单位】
河北农业大学 ;
【学科专业名称】
植物学
【学位年度】
2011
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
河北农业大学
【网络出版投稿时间】
2011-06-28
【关键词】
玉米大斑病菌 ;
聚酮体合成酶基因 ;
RNA干扰 ;
基因敲除 ;
功能分析 ;
【英文关键词】
Setosphaeria turcica ;
Polyketide synthase gene ;
RNA interference ;
Gene knock-out ;
Functional analysis ;
【中文摘要】
本试验前期克隆获得了1个玉米大斑病菌聚酮体合成酶基因(StPKS),为了明确该基因在玉米大斑病菌DHN黑色素合成以及病菌致病性中的作用,本研究利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)和基因敲除(Gene knock-out)两种方法分别创制StPKS基因沉默转化子和基因缺失突变体,通过对突变体进行分析,明确了该基因的功能,主要研究结果如下:
以pSilent-1质粒和pBU质粒为载体,分别构建了StPKS基因的RNAi和同源重组载体,采用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化方法,经潮霉素筛选、PCR及RT-PCR鉴定得到了5株StPKS基因表达量下降的RNAi转化子和1株基因缺失突变体。
与野生型相比,5株RNAi转化子的菌丝形态很不规则,出现膨大、分枝、变形等表型变化,菌落颜色均趋向于白色,黑色素含量明显低于野生型;基因缺失突变菌株ΔStPKS不产生分生孢子,菌丝细胞壁透明,分隔不明显,细胞内部可见许多液泡状结构,菌落颜色为白色,黑色素含量明显降低,与RNAi转化子的表型相似,表明StPKS基因的编码产物与玉米大斑病菌DHN黑色素的生物合成、菌丝发育及分生孢子形成密切...
【英文摘要】
A polyketide synthase gene of Setosphaeria turcica was cloned in our laboratory at the earlier research. In order to confirm the function of StPKS gene in DHN melanin biosynthesis and pathogenicity, RNA interference and gene knock-out techniques were used to construct StPKS gene silent transformants and deleted mutants. The founction of the StPKS gene was identified by analyzing the mutant, the main results were as follows: The transformation vectors pSilent-1 and pBU, were used to construct StPKS RNAi and ...
【更新日期】
2011-07-26
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