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大肠杆菌苯丙氨酸生物合成的调控研究  
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【英文题名】 The Regulation of Phenylalanine Biosynthesis in Escherichia Coli
【作者】 刘艳华;
【导师】 吕全军; 王玲;
【学位授予单位】 郑州大学;
【学科专业名称】 营养与食品卫生
【学位年度】 2010
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 郑州大学
【网络出版投稿时间】 2011-01-11
【关键词】 芳香族氨基酸; 苯丙氨酸; 生物合成; 串联表达; 基因敲除;
【英文关键词】 Aromatic amino acid; Phenylalanine; Biosynthesis; Co-expression; Gene knock-out;
【中文摘要】 研究目的 1构建苯丙氨酸高产菌株,使之适用于工业化生产,降低甜味剂阿斯巴甜原料苯丙氨酸的成本,进而降低阿斯巴甜的成本。 2搭建大肠杆菌合成代谢基因调控技术平台,为今后改造大肠杆菌芳香族氨基酸代谢通路打下基础,不仅可以用来提高天然产生的芳香代谢物苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸生产的产率和产量,还可以利用代谢工程的手段导入外源基因,用来合成其它芳香族化合物如靛蓝、吲哚乙酸、儿茶酚和奎尼酸及其衍生物等。 材料和方法 以大肠杆菌MG1655为受体菌,以pZE12为载体,对大肠杆菌苯丙氨酸合成代谢通路进行修饰。 1敲除编码酪氨酸分支代谢通路上的关键酶基因tyrA;同时敲除对pheA功能有抑制作用的基因pheL;为了基因调控的方便及消除pheA、aroF的本底表达,同时敲除基因pheA、aroF。 2从E.coli中克隆DAHP合成酶基因aroF、分支酸变位酶/预苯酸脱水酶基因pheA,并将这两个基因串联起来,克隆到pZE12中,再把质粒转入基因敲除菌中进行表达。 3从E.coli中克隆脱氢奎宁酸合成酶基因aroB和莽草酸激酶基因...
【英文摘要】 Objectives 1 To construct the strains which are suitable for industrial production of phenylalanine at low cost, which in turn reduces the expense of aspartame synthesis. 2 To establish the technical platform of E. coli anabolic gene regulation in order to set up the basis for transforming metabolic pathway of aromatic amino acid in E. coli in the future. Not only it can be used to enhance the production capacity and rate of aromatic amino acid, such as phenylalanine, tryptophan, and tyr...
【更新日期】 2011-03-04

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