【英文题名】
Purification、Characterization and Application of Cholesterol Oxidase from Recombinant E. Coli
【作者】
钟学敏 ;
【导师】
王武 ;
【学位授予单位】
江南大学 ;
【学科专业名称】
发酵工程
【学位年度】
2009
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
江南大学
【网络出版投稿时间】
2009-12-03
【关键词】
重组E.coli ;
胆固醇氧化酶 ;
分离纯化 ;
酶学性质 ;
蛋黄胆固醇 ;
【英文关键词】
recombinant E.coli ;
cholesterol oxidase ;
purification ;
enzymatic properties ;
treatment of yolk cholesterol ;
【中文摘要】
胆固醇氧化酶(EC1.1.3.6,COD)是胆固醇代谢过程中的关键酶,依赖辅酶FAD,能专一性地催化胆固醇转化为胆甾-4-烯-3-酮(4-cholesterol-3-one),在食品开发、医疗保健、临床检测、生物农药等方面具有广泛应用价值。本文以重组E.coli产COD为研究对象,以COD的开发和应用为目标,在COD的分离提取、酶学性质、以及酶的应用等方面进行了研究。
采用超声处理重组E.coli、70%(NH_4)_2SO_4盐析、CM Sepharose F.F.离子交换层析、Sephadex G-75 Fine凝胶过滤的提纯步骤,分离得到COD。提取纯化的COD比酶活达47.3 U/mg,纯化倍数达到45倍,酶活力回收率为21%。SDS-PAGE凝胶电泳显示,主条带明显,杂酶去除率较高。分子量为50 kD。
以提取的酶为研究对象,对COD的酶学性质和酶的稳定性进行了研究。利用SDS-PAGE测得该酶的分子量为50 kD;酶的最适反应温度和pH分别为37℃和7.5,酶在40℃以下具有良好的稳定性,酶的pH稳定范围为6-9;金属阳离子对该酶都有不同的影响,其中Hg~(2...
【英文摘要】
Cholesterol oxidase (EC1.1.3.6, COD) is the key enzyme of degradation cholesterol, which rely on the coenzyme FAD, to catalyze cholesterol into 4 -cholesterol-3-one. The significant functions of cholesterol oxidase (EC1.1.3.6, COD) in food processing, medical assay and biological pest-resistance were recognized gradually and showed potentially use. This research is mainly focused on COD purification from recombinant E.coli, enzymatic properties, and application of COD.
The extraction and purif...
【更新日期】
2009-12-22
【相同导师文献】
导师：王武 导师单位：江南大学 学位授予单位：江南大学基于化学修饰及分子改造提高肌酸酶的稳定性 [D]. 江南大学,2017Bacillus sp.肌氨酸氧化酶辅基排除与重构的研究 [D]. 江南大学,2016脱氮除磷假单胞菌的筛选及除污特性研究 [D]. 江南大学,2014Chlorella vulgaris油脂合成相关碳氮代谢基因转录差异和油脂积累的研究 [D]. 江南大学,2014抗坏血酸过氧化物酶和脱镁叶绿素酶的表达调控对芥蓝保鲜的影响 [D]. 江南大学,2013胆固醇氧化酶亲和纯化及酶稳定性研究 [D]. 江南大学,20133α-羟类固醇脱氢酶的密码子优化表达、亲和纯化及酶性质研究 [D]. 江南大学,2013谷胱甘肽分子印迹聚合物制备和性能的研究 [D]. 江南大学,2011重组胆固醇氧化酶表达的发酵优化 [D]. 江南大学,2010短杆菌胆固醇氧化酶基因的表达研究 [D]. 江南大学,2008
【相似文献】
中国期刊全文数据库
中国优秀硕士学位论文全文数据库
中国博士学位论文全文数据库
中国重要会议论文全文数据库
中国重要报纸全文数据库
中国学术期刊网络出版总库
【文献分类导航】从导航的最底层可以看到与本文研究领域相同的文献，从上层导航可以浏览更多相关领域的文献。
| 
点击下列相关研究机构和相关文献作者，可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献，使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。
