【英文题名】
Preparation of Monoclonal Antibody Against Melamine and Its Application in ELISA
【作者】
李春媛 ;
【导师】
周玉 ;
【学位授予单位】
吉林大学 ;
【学科专业名称】
预防兽医学
【学位年度】
2009
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
吉林大学；李春媛
【网络出版投稿时间】
2009-07-23
【关键词】
三聚氰胺 ;
单克隆抗体 ;
间接ELISA ;
【英文关键词】
Melamine ;
Monoclonal Antibody ;
Indirect ELISA ;
【中文摘要】
本实验采用戊二醛法,将三聚氰胺与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)分别进行偶联,制备出人工免疫抗原和检测抗原。采用足垫免疫和常规免疫方法免疫BALB/c小鼠,同时利用检测抗原通过间接ELISA方法进行特异性筛选,足垫免疫的血清效价为1:6400,常规免疫为1:12800。选择被免疫小鼠的腘淋巴结细胞与SP2/0细胞进行融合、筛选和克隆,获得1株能稳定分泌抗三聚氰胺的单克隆抗体的杂交瘤细胞株3H8,同时对单抗的效价、亲和力、亚类等进行了分析。选择3H8杂交瘤细胞的培养上清建立了三聚氰胺的间接竞争ELISA方法,并对其反应条件进行了优化。利用优化后的反应条件进行标准品的间接竞争ELISA检测并建立标准曲线,其标准曲线回归方程为y=-24.531x+37.862,R2=0.9937,最低检测限为0.12ng/mL,线性检测范围为0.12～8ng/mL。分别向牛奶和鸡蛋添加三聚氰胺标准品后进行检测,其平均回收率分别为80.45%、77.5%和76.03%。本研究为三聚氰胺酶联免疫快速检测试剂盒和免疫胶体金检测试纸条的开发研制奠定了基础。
【英文摘要】
In September 2008, an incident about food safety occurred in China. Baby milk food produced by more companies were contaminated with melamine,which brought a great harm to some people,especially the group of babies. Just the incident, it caught the wide attention for people to the toxicity of melamine after exposure to melamine-contamined milk.
Melamine, with a 1,3,5-triazine skeleton, is an organic compound and a trimer of cyanamide, which is widely used in the production of plastics, dyes, f...
【更新日期】
2009-08-14
【相同导师文献】
导师：周玉 导师单位：吉林大学 学位授予单位：吉林大学基于金属纳米材料的玉米赤霉烯酮免疫学检测方法的建立 [D]. 吉林大学,2022基于二氧化锰纳米片的玉米中伏马毒素B1免疫学检测方法的建立 [D]. 吉林大学,2022旋毛虫Ts-Sp-7蛋白的抗原性和对树突状细胞的免疫调节性研究 [D]. 吉林大学,2020基于金纳米棒的有机磷农药等离子体ELISA方法的建立 [D]. 吉林大学,2018基于金纳米材料的吡虫啉免疫学检测方法的建立 [D]. 吉林大学,2019基于改进型ELISA快速灵敏检测水体中苊烯检测技术研究 [D]. 吉林大学,2017荧蒽单克隆抗体的制备及其免疫层析试纸条的研制 [D]. 吉林大学,2016苊单克隆抗体的制备及免疫磁珠-ELISA方法的建立 [D]. 吉林大学,2016基于纳米磁珠的水体中蒽快速检测方法的建立 [D]. 吉林大学,2015基于纳米磁珠的牛乳中κ-酪蛋白快速检测方法的建立 [D]. 吉林大学,2014
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