【英文题名】
AFLP-based Sex Identification in Torreya Grandis Fort.
【作者】
梁丹 ;
【导师】
曾燕如 ;
【学位授予单位】
浙江林学院 ;
【学科专业名称】
森林培育
【学位年度】
2007
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
浙江林学院
【网络出版投稿时间】
2008-01-03
【关键词】
榧树 ;
香榧 ;
AFLP ;
叶片 ;
胚乳 ;
【英文关键词】
Torreya grandis Fort. ;
Torreya grandis Fort ;
ex Lindl. cv. Merrillii Hu ;
AFLP ;
leaf ;
endosperm ;
【中文摘要】
利用AFLP标记,就榧树(TorreyagrandisFort)的雌雄株鉴定开展了研究,获得了以下结果:
1.首次采用CTAB裂解.硅珠吸咐法,成功提取了榧树叶片和胚乳高质量的DNA,其OD260/OD280值大多在1.8-2.O之间,且琼脂糖凝胶电泳条带明亮、清晰。
2.首次建立了适合榧树叶片和胚乳的AFLP实验体系,为今后榧树分子生物学研究、构建遗传图谱奠定了基础。AFLP实验体系具体如下:
榧树DNA酶切连接体系为一步法:DNA为500ng,反应体积为25μl,包括Mse I、EcoR I、T4连接酶、M接头、E接头、l00×BSA、10×NEBtlffer2和T4缓冲液。37℃酶切连接过夜,12h可酶切完全。
预扩增优化体系:20μl的反应体系含模板DNA,dNTP,Mg2+,Taq聚合酶,MseI预扩引物和EcoRI预扩引物,缓冲液。PCR程序:94℃变性30s,56℃退火60s,72℃延伸60s,25个循环;72℃延伸5min。
选择性扩增优化体系:20μl的反应体系中有模板DNA,dNT...
【英文摘要】
AFLP (amplified fragment length polymorphism) has been applied to the differentiation of the male and female in Torreya grandis Fort. The following have been obtained:
1. It is the first time to successfully isolate high quality DNA from leaves and endosperm of Torreya grandis Fort, by a CTAB-silicon-based method. The DNA extracted had an OD260/OD280 value between 1.8-2.0 and was bright and clear when electrophoresized in agarose gel.
2. It is also the first time to establish a ...
【更新日期】
2008-02-17
【相同导师文献】
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