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树脂DEAE-E/H固定化氨基酰化酶的研究与乙酰-DL-蛋氨酸酶拆分液分离  
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【英文题名】 Studies of Immobilized Aminoacylase on Resin DEAE-E/H and Separation of Enzymatic Deacylation of N-acetyl-DL-methionin
【作者】 阎晓敏;
【导师】 赵林;
【学位授予单位】 天津大学;
【学科专业名称】 化学工程
【学位年度】 2005
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 天津大学
【网络出版投稿时间】 2006-05-24
【关键词】 树脂; 氨基酰化酶; 固定化; 蛋氨酸; 离子交换; 分离;
【英文关键词】 resin; aminoacylase; immobilization; methionine; ion-exchange; separation;
【中文摘要】 本文系统地测定了树脂DEAE-E/H的各种物理与化学参数对酶固定化可能产生的影响; 最终选定树脂8/4/12作为氨基酰化酶的固定化载体并作吸附研究和固定化酶评价; 改进了乙酰-DL-蛋氨酸的酶拆分液分离工艺,从而提高了分离效率和产品纯度。 固定化载体决定固定化酶的酶活和性质,因此本文从载体筛选入手,在已有实验研究的基础上,选择树脂DEAE-E/H系列的三个产品:12/4/12、8/4/12、4/4/6为研究对象,从功能基含量,比表面,孔径分布,交联度,固定化酶活等多方面比较,最终选定树脂8/4/12作为氨基酰化酶的固定化载体,实验发现固定化酶活最高可达956U/g。通过对比实验分析确定,自由酶溶液浓度为2.0mg/ml时,能使固定化酶活和酶活力收率同时达到峰值; 振荡吸附达到最佳效果的时间确定为8小时。在测定吸附等温线过程中发现酶蛋白吸附属非单分子层吸附,并且上柱循环固定化的效果要好于振荡固定化。考察了固定化酶的最适反应温度、pH值、热稳定性等反应条件,确定固定化氨基酰化酶对乙酰-DL-蛋氨酸的拆分没有明显的底物抑制现象。采用阳离子交换树脂柱对乙酰-DL-蛋氨酸的酶拆分液进行分离,实验结...
【英文摘要】 The performance and physical properties of DEAE-E/H resin is systematically studied in the paper, by which the possible influence on the immobilization of aminoacylase is also analyzed. Through the comparison between the resins 8/4/12, 12/4/12 and 4/4/6, the former is chosen as the carrier of immobilization. The adsorption of aminoacylase is investigated and the immobilized enzyme is assessed. Besides, the separation technique of enzymatic deacylation of N-acetyl-DL-methionin is also improved so that the ef...
【更新日期】 2006-06-16

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